Recombinant Human GS

商品属性：

货号	XG-DB2160	种属	Human
宿主	E.Coli	表达区间	604-703
分子量	32 KDa	标签	N-terminal His-IF2DI Tag
规格	50μg、200ug、1mg	用途	仅供科研实验

商品介绍：

别称：GLNS, GLUL, Glutamate ammonia ligase, Glutamate decarboxylase, Glutamine synthetase, GS, Pig43, Pig59  纯度 Greater than 95% as determined by SDS-PAGE 应用  Western Blot, ELISA 性状  Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 溶解方法Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex 存储 -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

表达、纯化、复性和定量，具体步骤如下：
一、重组蛋白质的诱导表达
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。

二、重组蛋白质的分离纯化
重组蛋白质的可溶性鉴定
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为
可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质为非可溶性蛋白（ 变性条件下）的分离纯化
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
公司正在出售的产品：
Tryptone Broth-capsule 培养基 5capsules incubation media Tryptone Broth-capsule 培养基 5capsules  CA12重组人 Carbonic Anhydrase XII / CA12 蛋白 (His 标签) Protein
玉蜀黍长蠕孢 支/瓶  颗粒酶K(GZMK)重组蛋白 Recombinant Granzyme K (GZMK)
VRBGAgar  MRPL44重组人 MRPL44 蛋白 (His 标签) Protein
BCYEAgarBase  IFNAR2 Protein Human 重组人 IFNAR2 / IFNABR 蛋白 (His 标签)
血平板2407090mm×20个用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB4789./T4789.37-2008，GB4789.30-2...  HA Protein H2N2 重组甲型流感 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)
Tryptone Powder (Casein Peptone) 胰蛋白胨 500g incubation media Tryptone Powder (Casein Peptone) 胰蛋白胨 500g  GHR重组大鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白 (His 标签) Protein
杏鲍菇 利用糖蜜生产罗母酒 支/瓶  HLA-DR(human leukoyte Antigen DR 0.5mgHLA-DR(human leukoyte Antigen DR) HLA-DR抗原
接种测试微生物琼脂培养基250g用于抗生素效价测定  TFRC重组人 Transferrin Receptor / TFRC / CD71 蛋白 (His 标签) Protein
假单胞分离琼脂 250g 用于假单胞菌群的测定  IFNB1 Protein Human 重组人 Interferon beta / IFN-beta / IFNB 蛋白
SS琼脂培养基2308g用于沙门氏菌和某些志贺氏菌的选择性分离培养。(《中华人民共和国药典》20  IL10RB Protein Mouse 重组小鼠 IL10RB / IL10R2 蛋白 (Fc 标签)
Tryptone Soya Agar 胰蛋白胨大豆琼脂现货 Oxoid 500G incubation media Tryptone Soya Agar 胰蛋白胨大豆琼脂现货 Oxoid 500G  FSTL1重组小鼠 FSTL1 蛋白 (Fc 标签) Protein
青枯假单胞菌 白酒和酒精生产的糖化用菌。 支/瓶  甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)重组蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone Related Protein (PTHrP)
胰胨大豆胨固绿琼脂250g用于滤膜细菌总数的测定和分离培养(NEOGEN方法)  CGB5重组人 CGB5 蛋白 (His 标签) Protein
BismuthSulfiteAgarMedium  IFNG Protein Human 重组人 IFN-gamma / IFNG / γ-IFN 蛋白
沙门、志贺菌属琼脂培养基(SS琼脂)2350g用于分离培养沙门氏菌(氏菌除外)(GB-9标准)。  EGF Protein Canine 重组狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白 (His 标签)
Tryptone Soya Broth(Soybean Casein Digest Medium USP)胰蛋白胨大豆肉汤 Oxoid 500G incubation media Tryptone Soya Broth(Soybean Casein Digest Medium USP)胰蛋白胨大豆肉汤 Oxoid 500G  Spike中东呼吸综合征  (HCoV-EMC/2012) Spike protein fragment (RBD, aa 367-606, His 标签) Protein
青春双歧杆菌 产蛋白酶，用于皮毛软化。 支/瓶  Tau protein 微管相关蛋白(抗原 0.5mgTau protein 微管相关蛋白(抗原)
StandardIINutrientAgar  CTLA4重组人 CTLA4 / CD152 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
亚铋琼脂培养基 250g 用于沙门氏菌选择性分离培养  IFNL1 Protein Human 重组人 IL29 / IFNL1 蛋白
Recombinant Human GS亚碲酸(亚碲酸盐肉汤冻干配套试剂)SR00602mg/支x添加于(0220成亚碲酸盐肉汤。  TREM1 Protein Human 重组人 TREM1 蛋白 (His & Fc 标签)
Tryptone 胰蛋白胨 500g incubation media Tryptone 胰蛋白胨 500g  OMG重组小鼠 OMGP / OMG 蛋白 (aa 1-245, His 标签) Protein
新月弯孢霉 葡萄酒酵母,耐高温达55℃ 支/瓶  AATK peptide 细胞凋亡关联酪氨酸激酶抗原 0.5mgAATK peptide 细胞凋亡关联酪氨酸激酶抗原
Andrade'sCarbohydradeBroth  CXCL10重组人 CXCL10 / Crg-2 蛋白 Protein
AFPA  IFNL1 Protein Human 重组人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白 (His 标签)
HydrogenSulfideIndoleMotilityMedium  COLEC12 Protein Rat 重组大鼠 CLP1 / COLEC12 蛋白 (His 标签)
重组蛋白的制备涉及多个步骤，包括基因克隆、表达系统选择和蛋白纯化：
● 基因克隆：基因克隆是将目标基因导入表达载体中的过程。研究人员可以选择不同的克隆方法，如限制性酶切克隆、PCR扩增克隆等，根据需要构建目标基因的DNA序列。
● 表达系统选择：选择适合的表达系统是重组蛋白制备的关键一步。常用的表达系统包括大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞。每种表达系统都具有不同的优缺点，适用于不同类型的蛋白质表达。
5大蛋白表达系统：

​​​​​​​