Recombinant Human FGF 23

● 基因克隆：基因克隆是将目标基因导入表达载体中的过程。研究人员可以选择不同的克隆方法，如限制性酶切克隆、PCR扩增克隆等，根据需要构建目标基因的DNA序列。
● 表达系统选择：选择适合的表达系统是重组蛋白制备的关键一步。常用的表达系统包括大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞。每种表达系统都具有不同的优缺点，适用于不同类型的蛋白质表达。
5大蛋白表达系统：
商品属性：

货号	XG-DB1957	种属	Human
宿主	E.Coli	表达区间	25-251
分子量	24.9 kDa	标签	N-terminal His Tag
规格	50μg、200ug、1mg	用途	仅供科研实验

商品介绍：

别称：ADHR, FGF-23, Fgf23, FGF23_HUMAN, FGFN, Fibroblast growth factor 23, Fibroblast growth factor 23 C-terminal peptide, Fibroblast growth factor 23 precursor, HPDR2, HYPF, Phosphatonin, PHPTC, Tumor derived hypophosphatemia inducing factor, Tumor-derived hypophosphatemia-inducing factor  纯度 Greater than 95% as determined by SDS-PAGE 应用  Western Blot, ELISA 性状  Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 溶解方法Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex 存储 -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

表达、纯化、复性和定量，具体步骤如下：
一、重组蛋白质的诱导表达
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。

二、重组蛋白质的分离纯化
重组蛋白质的可溶性鉴定
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为
可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质为非可溶性蛋白（ 变性条件下）的分离纯化
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
公司正在出售的产品：
氯血琼脂基础 Sodium Chloride Blood Agar Base 用于副溶血性弧菌的溶血试验(GB标准)  PDCD1LG2重组小鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 (Fc 标签) Protein
大豆氢化卵0脂 HSPC 1公斤 BR，PC=95%  Toll样受体9(TLR9)重组蛋白 Recombinant Toll Like Receptor 9 (TLR9)
酪蛋白琼脂250g/瓶用于蜡样芽胞杆菌的酪蛋白分解试验incubationmedia酪蛋白琼脂250g/瓶用于蜡样芽胞杆菌的酪蛋白分解试验  SRI重组人 SRI / Sorcin 蛋白 (His & GST 标签) Protein
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氯蔗糖琼脂 250(g) incubation media 氯蔗糖琼脂 250(g)  IL6重组小鼠 IL6 / Interleukin-6 蛋白 Protein
双料乳糖胆盐培养基 Twofold Lactose Bile Salt Broth 250克 用于化妆品中粪大肠菌群的测定  辅肌动蛋白α3(ACTN3)重组蛋白 Recombinant Actinin Alpha 3 (ACTN3)
豆粉琼脂(血琼脂基础)250用于配制血琼脂、巧克力琼脂及亚碲酸盐琼脂incubationmedia豆粉琼脂(血琼脂基础)250用于配制血琼脂、巧克力琼脂及亚碲酸盐琼脂  FUOM重组人 FUOM / Fucose mutarotase / FucM / C10orf125 蛋白 (His 标签) Protein
木糖-明胶培养基 250g 用于蜡样芽孢杆菌明胶液化试验  PLA2G7 Protein Human 重组人 PLA2G7 / PAFAH 蛋白 (His 标签)
TPY琼脂培养基250g用于双岐杆菌分离培养(GB标准)  TP53 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 p53 / TP53 蛋白
氯蔗糖琼脂 Sodium Chloride Sucrose Agar 用于副溶血性弧菌的选择性分离培养(GB标准)  ACVRL1重组狗 ALK1 / ACVRL1 蛋白 (Fc 标签) Protein
无菌豚鼠血清 Sterile Defidrinated Guinea pig Blood 200毫升 BR  NSE (neuron specific enolase 0.5mgNSE (neuron specific enolase) 神经元特异性烯醇化酶抗原
肉浸液肉汤250g/瓶用于蜡样芽胞杆菌的培养incubationmedia肉浸液肉汤250g/瓶用于蜡样芽胞杆菌的培养  TNFRSF14重组人 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His 标签) Protein
NeutralRed-bileSaltPeptoneGlucoseMedium  PLAC9 Protein Human 重组人 PLAC9 / Placenta-specific 9 蛋白 (Fc 标签)
PseudomonasAgarMediumforDetectionofPyocyanin  PROC Protein Mouse 重组小鼠 PROC1 / Protein C / PROC 蛋白 (His 标签)
氯化三苯四氮唑-沙保罗培养基 250(g) incubation media 氯化三苯四氮唑-沙保罗培养基 250(g)  LCN2重组小鼠 LCN2 / NGAL 蛋白 (His 标签) Protein
GN增菌液 250g 用于革兰氏阴性菌的选择性培养，特别是志贺氏菌和沙门氏菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.17，...  C-erbB-4/HER4/erbB-4 (epidermal growth factor receptor4 0.5mgC-erbB-4/HER4/erbB-4 (epidermal growth factor receptor4) c-erbB-4癌基因抗原
液体大豆酪蛋白消化物培养基SoybeanCaseinDigestMedium用于药品无菌检测  CCL14重组人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (aa 28-93, His 标签) Protein
CIN-1添加剂 1ml*5 每支添加于200ml  PLAU Protein Human 重组人 Urokinase / PLAU (activated by trypsin) 蛋白 (His 标签)
Recombinant Human FGF 23TSA胰蛋白胨大豆琼脂培养基(大豆消化酪素琼脂培养基)28072250g用于普通的或营养要求较高的细菌的培养，还用于医药工业洁净室无菌程度的监测及消毒剂消毒效果的...  FGFR3 Protein Mouse 重组小鼠 FGFR3 / CD333 蛋白 (His & Fc 标签)

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