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12303--25------NCAMembran_1,2µm_25mm_100pc
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文献和实验【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
液: 1X T4 DNA Ligase Buffer: [50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 µg/ml BSA, (pH 7.5 @ 25°C)]。推荐DNA浓度(0.1 - 1 µM 的5′末端)。 使用注意:ATP是反应必须的辅因子。这一点与要求NAD作辅因子的大肠杆菌DNA连接酶不同。 如在反应体系中补加1 mM的ATP,连接反应还可以在NEB提供的四种限制性内切酶缓冲液(NEBuffers)或在T4 DNA多聚
; M. pirum) PCR reagents : Taq polymerase ( 5 U / ul ) dNTP( dGTP, dCTP, dTTP, dATP, 1.25 mM each ) 10x PCR buffer (with 1.5mM MgCl2) 25mM MgCl2 sterile ddH2O Machine / Equipment: PCR thermal cycler agarose电泳设备 DNA电泳胶体观察设备 无菌PCR反应管 无菌1.5 ml
Single Primer ("Semi-Random") P
Reamplification 40 µL H2O 10 µL 10x M-PCRB 10 µL 4 dNTPs @ 2 mM each 10 µL Pn primer @ 5 µM 10 µL Po primer @ 0.2 µM 10 µL DNA from part 1 10 µL "T/TS" @ 0.4 u Taq/µL --------- 100 µL Load glass capillaries and amplify: 30"x94°C 30
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