鸟氨酸脱酶(ODC)活性检测试剂盒产品图

鸟氨酸脱酶(ODC)活性检测试剂盒

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  • ￥710
  • wksubio
  • WS6510F
  • 国内
  • 2026年07月23日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 库存：

      大量

    • 英文名：

      Ornithine Dease (ODC) Activity Detection Kit

    • CAS号：

      WS6510F

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      24T

    本试剂盒仅供科研使用
    乙二醛酶Ⅱ(glyoxalaseⅡ,GlyⅡ) 活性测定说明书
    （货号：WS5410F 分光法 48 样）
    一、产品简介：
    乙二醛酶系统是甲基乙二醛（MG）的主要清除途径，乙二醛酶Ⅱ（GlyⅡ，EC 3.1.2.6）
    是乙二醛酶系统中的一种酶。在哺乳动物，植物和细菌中普遍表达。
    乙二醛酶Ⅱ催化 S-D-乳酰谷胱甘肽(S-D-lactoylglutathione, SLG)水解为还原型谷胱甘
    肽（GSH）和 D-乳酸。还原型谷胱甘肽（GSH）与 DTNB 与反应生成黄色复合物，该有
    色物
    质在 412nm 处有特征吸收峰；通过检测 412nm 处上升速率，进而得出乙二醛酶Ⅱ
    （GlyⅡ）酶活性的大小。
    二、测试盒组成和配制：
    三、所需的仪器和用品：
    可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、可调式移液器、低温离心机、研钵、
    蒸馏水。
    四、乙二醛酶Ⅱ(GlyⅡ)活性测定：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
    样本和试剂浪费！
    1、样本制备：
    称取 0.1g 组织样本（水分充足可取 0.2g），先加入 1mL 的提取液，冰浴匀浆，12000rpm，
    4℃离心 10min，上清液待测。
    【注】：若增加样本量，可按照组织质量（
    g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取
    2、上机检测：
    ① 可见分光光度计预热，调节波长至 412nm，蒸馏水调零。
    ② 所有试剂预热至室温（25℃），在 1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）中依次加入下列试
    剂（依据样本检测数量，试剂一和二可按照比例 570:20 提前混合，直接加 590μL
    即可）：
    【注】：1. 若ΔA 值在零附近徘徊，可增加样本加样体积 V1（如增至 200μL，则
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    提取液
    提取液 60mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂一
    液体 30mL×1 瓶试
    4℃保存
    试剂二
    液体 1mL ×1 支
    4℃保存
    试剂三
    粉体 mg×2 支
    -20℃保存
    每支用前甩几下使试剂落入底部，分别加
    0.55mL 蒸馏水完全溶解备用，溶好的试剂
    可-20 度分装保存，禁止反复冻溶。
    标准品
    粉体 mg×支
    -20℃保存
    若重新做标曲，则用到该试剂。
    试剂名称（
    μL）
    测定管
    样本
    100
    试剂一
    570
    试剂二
    20
    试剂三
    20
    混匀，室温（25℃）下，30s 后立即于 412nm
    处读取吸光值 A1，3min 后再读取 A2。
    ΔA=A2-A1。本试剂盒仅供科研使用
    2
    试剂一相应减少），或增加反应时间 T（如增至 10min 后读取 A2），或增
    加样本取样质量 W。则改变后的 V1 和 T 和 W 需代入公式计算。
    2. 若ΔA 值大于 0.8 或者 A1 值大于 1.2，则需减少样本加样体积 V1（如减至
    50μL，则试剂一相应增加），或减少反应时间 T（如减至 1min 后读取 A2）。
    则改变后的 V1 和 T 需代入公式计算。
    五、结果计算：
    1、标准曲线为 y = 0.0199x - 0.0105；x 为标准品摩尔质量（nmol），y 为ΔA。
    2、按样本蛋白浓度计算：
    酶活定义：每毫克组织蛋白每分钟生成 1nmol 的 GSH 定义为一个酶活力单位。
    GlyⅡ(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0105)÷0.0199]÷(V1×Cpr)÷T=167.5×(ΔA+0.0105)÷Cpr
    3、按样本鲜重计算：
    酶活定义：每克组织样本每分钟生成 1nmol 的 GSH 定义为一个酶活力单位。
    GlyⅡ(nmol/min/g 鲜重)=[(ΔA+0.0105)÷0.0199]÷(W×V1÷V)÷T=167.5×(ΔA+0.0105)÷W
    V1---加入样本体积，0.1mL；
    V---加入提取液体积，1mL；
    W---样本质量，g；
    T---反应时间，3min；
    Cpr---蛋白质浓度，mg/mL，建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒。
    附：标准曲线制作过程：
    1
    制备标准品母液（10μmol/mL）：标准品溶于 1mL 蒸馏水中，（母液需在两天内用且-20℃保存）。
    2
    把母液用蒸馏水稀释成六个浓度梯度的标准品：0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5. μmol/mL。也可根据实际样
    本来调整标准品浓度。
    3
    依次在 EP 管中加入 100μL 标准品+590μL 试剂一+20μL 试剂二，混匀后静置 5min 后全部液体转
    移至 1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）中，于 412nm 读值，根据结果即可制作标准曲线。

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