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- DM-CM1037
- 上海
- 2026年01月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
6个月
- 保存条件：
2-8°
- 供应商：
上海笃玛生物科技有限公司
- 库存：
999
- 规格：
100管/48样
酸性木聚糖酶（Acidic Xylanase，ACX）测定试剂盒说明书
微量法100T/48S
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生，能催化水解木聚糖，也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶，可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖，降低酿造中物料的粘度，促进有效物质的释放，以及降低饲料中的非淀粉多糖，促进营养物质的吸收利用，因而广泛的应用于酿造和饲料工业中，ACX一般分离自耐酸的真菌，细菌及部分霉菌。
测定原理：
ACX在酸性环境下能将木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，进一步在沸水浴条件下与3,5-二硝基水杨酸发生显色反应，在540nm处有特征吸收峰，反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，通过测定反应液在540nm吸光值增加速率，可计算ACX活力。
自备实验用品及仪器：
天平、低温离心机、恒温水浴锅，可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
试剂组成和配制：
缓冲液：液体90mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。（若出现白色絮状或颗粒状沉淀，可60℃加热溶解后使用）。
试剂二：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。
粗酶提取：
1. 发酵液：发酵液于8000g，4℃，离心15min，取上清，作为待测样品。
2. 酶干粉：称约0.1mg，加1mL缓冲液溶解待测。
3. 组织样本：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL缓冲液）进行冰浴匀浆，然后8000g，4℃，离心10min，取上清待测。
测定操作表：
1、 分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至540nm。
2、操作表
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对照管 |
测定管 |
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样品（μL） |
60 |
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灭活的样品（μL） （95℃水浴15min） |
60 |
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缓冲液（μL） |
90 |
90 |
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试剂一（μL） |
60 |
60 |
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混匀，50℃水浴中反应30min，立即沸水浴中10min灭活。(注意不要让盖子爆开，以免进水，改变了反应体系) |
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试剂二（μL） |
90 |
90 |
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混匀，沸水浴显色5min，取200µL于微量石英比色皿/96孔板中540nm处测定吸光值A，计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。 |
||
ACX计算公式：
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线：y = 2.5554x - 0.002 ，R2 = 0.9983
1. 按液体体积活力计算：
酶活定义：50℃，pH4.8条件下，每毫升液体样本每分钟分解木聚糖产生1nmol 还原糖所需的酶量为一个酸性木聚糖酶的活力单位。
ACX活力（nmol/min/mL）= （ΔA+0.002）÷2.5554÷150÷T×稀释倍数×106
= 435× (ΔA+0.002)
2. 按蛋白浓度计算：
酶活定义：50℃，pH4.8条件下，每毫克蛋白每分钟分解木聚糖产生1nmol 还原糖所需的酶量为一个酸性木聚糖酶的活力单位。
ACX活力（nmol/min/mg prot）= （ΔA +0.002）÷2.5554÷150÷T×稀释倍数×106÷Cpr
= 435×(ΔA +0.002 ) ÷Cpr
3. 按鲜重计算：
酶活定义：50℃，pH4.8条件下，每克样本每分钟分解木聚糖产生1nmol 还原糖所需的酶量为一个酸性木聚糖酶的活力单位。
ACX活力（nmol/min/g鲜重）= （ΔA +0.002）÷2.5554÷150÷T×稀释倍数×106÷W
= 435×(ΔA +0.002 ) ÷W
150：木糖的分子量；T：反应时间，30min；稀释倍数=V反总÷V样=300µL÷60µL=5；
106：转化因子，即1mg/mL=106ng/mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g。
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y = 1.2777x - 0.002 ，R2 = 0.9983
1. 按液体体积活力计算：
酶活定义：50℃，pH4.8条件下，每毫升液体样本每分钟分解木聚糖产生1nmol 还原糖所需的酶量为一个酸性木聚糖酶的活力单位。
ACX活力（nmol/min/mL）= （ΔA+0.002）÷1.2777÷150÷T×稀释倍数×106
= 869.6× (ΔA+0.002)
2. 按蛋白浓度计算：
酶活定义：50℃，pH4.8条件下，每毫克蛋白每分钟分解木聚糖产生1nmol 还原糖所需的酶量为一个酸性木聚糖酶的活力单位。
ACX活力（nmol/min/mg prot）= （ΔA +0.002）÷1.2777÷150÷T×稀释倍数×106÷Cpr
= 869.6×(ΔA +0.002 ) ÷Cpr
3. 按鲜重计算：
酶活定义：50℃，pH4.8条件下，每克样本每分钟分解木聚糖产生1nmol 还原糖所需的酶量为一个酸性木聚糖酶的活力单位。
ACX活力（nmol/min/g鲜重）= （ΔA +0.002）÷1.2777÷150÷T×稀释倍数×106÷W
= 869.6×(ΔA +0.002 ) ÷W
150：木糖的分子量；T：反应时间，30min；稀释倍数=V反总÷V样=300µL÷60µL=5；
106：转化因子，即1mg/mL=106ng/mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g。
注意事项
1. 吸光度变化应该控制在0.01～0.8之间，否则加大样品量或稀释样品，注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变。
2. 试剂盒2-8℃保存，保质期3个月，建议尽快使用。
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文献和实验具有羟基、羧基、砜基等助色团在溶液中具负电荷的色素。这种色素与 Na、 K、 Ca离子构成的盐在溶液中呈碱性。它与具正电荷的细胞重要组分相结合，或是浸润到细胞间隙使细胞质、红血球、肌纤维等染色。
大鼠尿微量白蛋白 (ALB) 酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书 本试剂盒仅供体外研究使用 ! 预期应用 ELISA 法定量测定大鼠尿液或其它相关生物液体中 ALB 含量。 实验原理 用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗 ALB 抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗 ALB 抗体、 HRP 标记的 亲和素 ，经过彻底洗涤后用底物 TMB 显色
，分子量 272.4 。主要由卵巢卵泡 Graffian 和胎盘分泌，肾上腺少量分泌。血液中 98%雌二醇 (E2) 主要与性激素结合球蛋白 (SHBG) 结合，以及少量的血清蛋白，如白蛋白。极少一部分成为游离激素。在靶器官，雌二醇受体联合体影响雌激素活性 . 这些器官包括卵泡、子宫、乳房、阴道、尿道、丘脑下部、垂体和肝脏，皮肤也有少量。 应用 本酶联免疫吸附测定试剂盒运用竞争抑制酶标免疫分析法定量测定牛奶中 E2 含量。试剂盒中包含 96 次检测所需的酶联免疫试验试剂，包括标准
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