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6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)测试盒

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  • ¥750 - 1400
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  • DM-W-A106
  • 2025年11月01日
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    • 应用范围

      科研实验

    • 供应商

      上海笃玛生物科技有限公司

    • 抗原来源

      电询

    • 适应物种

      电询f

    • 规格

      100管/96样/50管/48样

    规格:100管/96样产品价格:¥1400.0
    规格:50管/48样产品价格:¥750.0
    6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)测试盒

    产品简介

    中文

    名称

    6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)测试盒

    储存

    条件

    -20℃
    有效期 6个月

    英文

    名称

    6-Phosphogluconate ehydrogenase(6PGDH)Activity Assay Kit
    别名 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶试剂盒 6PGDH Kit 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)试剂盒 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)测试盒

    检测

    方法

    微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
    单位
    规格 100T/96S;50T/48S

     

    测定意义:磷酸戊糖途径途径中6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)和6PGDH依次催化NADPH合成,与能量的平衡、生长速率和细胞活力等密切相关。此外,6PGDH逆境生理中具有重要作用。

    测定原理:6PGDH催化6-磷酸葡萄糖酸和NADP+生成NADPH,NADPH在430 nm有特征吸收峰,而NADP+没有;通过测定340nm吸光度增加速率,计算6PGDH活性。

    需要的仪器,耗材:低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

     

    公司简介

    本公司始终秉持以质量求生存,以创新求发展的理念,坚持专业、专心、诚心的宗旨,为广大科研用户服务。本公司郑重承诺:本公司对销售的所有产品负责,诚信经营。上海笃玛生物科技有限公司的诚信、实力和产品质量获得业界的认可。欢迎各界朋友莅临参观、指导和业务洽谈。
    产品细节图片1


    6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)测试盒

    测定意义

    磷酸戊糖途径途径中6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)和6PGDH依次催化NADPH合成,与能量的平衡、生长速率和细胞活力等密切相关。此外,6PGDH逆境生理中具有重要作用。

    测定原理

    6PGDH催化6-磷酸葡萄糖酸和NADP+生成NADPH,NADPH在340 nm有特征吸收峰,而NADP+没有;通过测定340nm吸光度增加速率,计算6PGDH活性。

    自备仪器和用品

    低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、酶标仪、96孔板和蒸馏水。

    试剂组成和配制

    提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。

    试剂一:液体19mL×1瓶,4℃保存。

    试剂二:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。

    试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存。

    粗酶液提取

    1、细菌、细胞或组织样品的制备:

    细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为1000~5000:1的比例(建议2000万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

    组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

    2、血清(浆)样品:直接检测。

     

    测定操作

    1.酶标仪预热30min,调节波长到340 nm。

    2.将试剂二和试剂三转移至试剂一中充分溶解;在37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴10min以上;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

    3.取96孔板,依次加入10μL样本190μL试剂一,于340nm处测定3min内吸光值变化,第10 s吸光值记为A1,第190s吸光值记为A2。△A=A2-A1

    注意:空白管只需要做一次。

     产品细节图片2

    计算公式

    使用96孔板测定的计算公式如下

    1、血清(浆)6PGDH活力的计算:

    单位的定义:每mL血清(浆)每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。

    6PGDH(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=2143.6×ΔA

    2、组织、细菌或细胞中6PGDH活力的计算:

    (1)按样本蛋白浓度计算:

    单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol NADPH定义为一个酶活力单位。

    6PGDH(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=2143.6×ΔA÷Cpr

    (2)按样本鲜重计算:

    单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol NADPH定义为一个酶活力单位。

    6PGDH(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=2143.6×ΔA÷W

    (3)按细菌或细胞密度计算:

    单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol NADPH定义为一个酶活力单位。

    6PGDH(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=1.072×ΔA

    V反总:反应体系总体积,1×10-3 L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,3 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;2000:细菌或细胞总数,2000万。

    注意事项

    本产品仅作科研用途!

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