培养皿150mm

蛋白质印迹（Western blot）实验方案

冰上，用冰冷的 PBS 洗涤细胞。2. 吸出 PBS，然后加入冰冷的裂解缓冲液（每 107 细胞/100 mm 培养皿/150 cm2 培养瓶加入 1 ml；每 5×106 细胞/60 mm 培养皿/75 cm2 培养瓶加入 0.5 ml）。3. 用预冷的塑料细胞刮棒刮下贴壁细胞，然后轻轻地将细胞悬浮液转移至预冷的微量离心管中。4. 在 4 ℃ 下持续搅拌 30 分钟。5. 在 4 ℃ 预冷的离心机中以 16000 × g 的转速离心 20 分钟。6. 轻轻地从离心机中取出离心管，置于冰上。将上清

小鼠肿瘤样本单细胞悬液的制备及注意事项

小鼠肿瘤样本制备 颈椎脱臼法将荷瘤小鼠处死，75% 酒精浸泡 5 min，取出小鼠置于无菌操作台上。 左手持镊子，右手持弯剪，沿肿瘤边缘剪下长约 1cm 的口子，可清晰看见肿瘤附着于皮下，沿肿瘤边缘轻轻剪开连接处，剥离肿瘤。 将剥离的肿瘤放入100 mm 的培养皿中，并在室温下加入 5~10 mL 的 1640 基础培养基。 单细胞悬液的制备 A.混合酶消化法 待所有肿瘤剥离完毕后，将肿瘤转移至 1.5 mL EP 管中，手持弯剪将肿瘤充分剪碎，边剪边加入1640基础培养基，静置数秒

类器官培养与应用——肝类器官

25ng/ml   Activin A - - - 100ng/ml - - - - - C687 ROCKi - - 10μM - - - - - -     iPSCs 培养和传代 1、将 100mm 培养皿包被 5ml 0.1%（w/v）的明胶，室温静置 15min 至明胶凝固。 2、在明胶上接种丝裂霉素处理过的 MEFs 细胞悬浮液，细胞数约为 1.8×106 个。放置在 37℃