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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
深圳中科百抗生物科技有限公司
- 英文名:
RPMI 1640 medium
- 规格:
500ml
RPMI 1640,一种广泛应用于细胞培养的培养基,最初由Moore等人于1966年在Roswell Park Memorial Institute研发而成,因此得名。其最初用于淋巴细胞的培养,但现已发现适用于多种哺乳动物细胞,包括HeLa细胞、Jurkat细胞、MCF-7细胞、PC12细胞、PBMC细胞、星形胶质细胞和癌细胞等。
RPMI 1640培养基适用范围广泛,可用于体外培养多种哺乳动物细胞,如人类、小鼠、猴等。它含有多种必需营养成分,为细胞提供了合适的营养物质和pH值,有助于保持细胞的健康生长和增殖。
那么,我们来看一下RPMI 1640培养基的配制方法吧,以配制500mL的RPMI 1640培养基为例。
1.实验试剂与用具的准备:
- 500mL烧杯
- 碳酸氢钠
- 超纯水
- RPMI 1640培养基干粉
- 天平
- 玻璃棒或磁力搅拌器
- 0.2μm滤膜
2.配制RPMI 1640培养基:
(1)称取适量RPMI 1640培养基干粉至500mL烧杯中,加入300mL超纯水,用玻璃棒或磁力搅拌器搅拌30分钟,使其充分溶解。
(2)待溶液澄清后,加入1.0g碳酸氢钠(分析纯),继续搅拌5分钟,直至完全溶解。
(3)加入超纯水至500mL,使容量定容。
(4)必要时使用1mol/L的NaOH或1mol/L的HCl调整pH值至7.20-7.30。由于过滤会导致培养基的pH值稍微偏高,因此在此步骤中,需要将目标pH值(7.20-7.40)调低一些。
(5)使用0.2μm的滤膜进行正压过滤除菌(注意进行无菌操作)。
(6)过滤结束后,可以取少许液体培养基进行菌检。待检测合格后再使用。此时,液体培养基的保质期为1年,储存条件为2~8℃。根据细胞的生长特性,可向培养基中添加双抗体、胎牛血清或生长因子等成分。
需要注意的是:RPMI 1640培养基含有多种细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等成分,但不含蛋白质、脂质或任何生长因子。在使用时,需要配合血清或无血清添加物,通常添加10%的胎牛血清(FBS)。由于使用了碳酸氢钠缓冲系统,因此需要在5-10%的CO2环境中维持生理pH值。
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文献和实验相关专题 在实验中我们经常会需要自己配置RPMI1640培养基,在配置的过程中需要注意哪些?哪些因素会影响到RPMI1640培养基的配置效果呢?生物帮为您盘点 了配制RPMI1640培养基13点需知,详情请看下文: 1)配制培养基最好使用新制备的三蒸水。一般在试验前当天或前一天制备为好。调节pH值的酸碱溶液也应该使用这种水配制。 2)培养液配好后,应先抽取少许放入培养瓶内,于37℃温箱内置24~48hr
40 维生素 B 12 0.005 RPMI-1640(A) 无酚红细胞培养基(粉末型)成分
1) 配制培养基最好使用新制备的三蒸水。一般在试验前当天或前一天制备为好。调节pH值的酸碱溶液也应该使用这种水配制。 2) 制备培养基的器皿清洗要绝对干净,烤干后备用(滤器、滤膜、量筒、移液管及盛放培养基的小瓶等存放和转移培养基液体的器具都应进行灭菌)。 3) 溶解培养基:将干粉培养基溶于总量1/3的水中,再用水洗包装袋内面两次,倒入培养液中。振荡











