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- 详细信息
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- 英文名:
支原体去除试剂(500x)
- 库存:
999
- 供应商:
上海圻明
- 细胞类型:
详见说明
- 组织来源:
详见说明
- 物种来源:
详见说明
- 细胞形态:
详见说明
- 运输方式:
常温/冷冻
- 生长状态:
详见说明
- 规格:
1/5ml
欢迎光临圻明生物细胞专场,我们拥有上千种类齐全的细胞资源库,让广大科研工作者买的放心,用的省心!
支原体去除试剂(500x)哪里买传代建议一传二
1)当细胞汇合度达到85%以上时,可进行传代。
2)在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,收集瓶内的培养基;
3)向培养瓶内加入3ml无菌的1×PBS 后,水平放置培养瓶,使PBS能够浸润到培养瓶底面上所有的面积,吸弃PBS;
4)向瓶内加入消化液1ml,浸润底面后放入37℃ CO2培养箱中孵育1~2min;
5)孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起,若全部消化下来则直接向培养瓶内加入2ml含10%FBS的完全培养基中,将悬液吸入15ml离心管;
注:如还有部分细胞未消化下来,可采用分步消化:
① 准备一个无菌的15ml离心管,加入2ml含10%FBS的完全培养基;
② 将消化下来的细胞吸入①中的离心管内中和(避免吹打);
③ 向之前消化的培养瓶中加入1ml胰酶继续消化2min左右,轻拍培养瓶,95%左右细胞脱落后加入2ml含10%FBS的完全培养基中和,中和后的细胞悬液移入①中的离心管内。
6)1000rpm离心5min;
7)准备两个新的T-25培养瓶,各加入4ml完全培养基。
8)离心完成后,弃上清,用2ml完全培养基重悬离心细胞,将重悬后的细胞转入2个T-25培养瓶,每个培养瓶各1ml;
9)水平放置培养瓶,震荡混匀后,将培养瓶置于37℃,5%CO2培养箱中静置培养。

冻存 (细胞冻存建议每瓶T25冻一支)
1)~6)参照传代步骤
7)离心完成后,弃上清,用1mL冻存液重悬细胞沉淀,然后转入1.8ml冻存管中;
8)将冻存管转入填充满异丙醇的程序降温盒中,之后转入-80℃冰箱中过夜降温;
9)第二天,取出降温完成的序降温盒中的冻存管,尽快转入液氮罐中保存。

产品仅供科研不用于诊断治疗等其他用途。欢迎新老客户咨询订购支原体去除试剂(500x)哪里买,其他相关产品
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文献和实验污染不除,实验结果势必或多或少产生偏差,故进行实验前,确定细胞为mycoplasma-free至关重要,实验结果之数据才有意义。 支原体污染一般来源于血清,实验仪器、培养基或其他试剂蔓延开来。怎样预防和去除支原体污染呢?一般只有三种抗生素(四环素,大环内脂和喹诺酮)能有效对付支原体。在低浓度时,这些抗生素不会产生耐药性,且对哺乳动物细胞的毒性较小。四环素和大环内酯能结合30S和50S核糖体亚基,从而抑制蛋白质合成,喹诺酮抑制DNA旋转酶。因此可以在细菌DNA复制及蛋白质合成两个层面上抑制
,并变得浑浊。在显微镜下,菌丝体通常呈细长的丝状体,有时呈密集的孢子团。许多种霉菌的孢子在休眠阶段能够耐受极其恶劣和不宜生长的环境,当其遇到合适的生长条件时才会被激活。 病毒 病毒是一种微小的感染性病原体,利用宿主细胞的结构进行繁殖。它们的体积极小,难以在培养中被检测到,也难以从细胞培养实验室使用的试剂中去除。由于大多数病毒对宿主有非常严格的要求,因此,它们通常不会对宿主以外物种的细胞培养物产生不良影响。但被病毒感染的细胞培养物会对实验室人员造成严重的健康威胁,尤其是当实验室培养的是人类或灵长类的细胞
s变性、55℃/1min退火、72℃/1min延伸,循环30次后72℃延伸5min。第1次PCR反应取模板10μL,第2次PCR反应以第1次PCR扩增产物为模板取1μL。 一种名为BM-Cyclin的化学试剂,除体外培养癌细胞中支原体污染具体方法: 1、选用抗支原体药物(BM-Cyclin-1、2 ),磷酸缓冲液配制,溶液抽滤除菌,0~4℃保存。 2、细胞处理过程:细胞传代同时加BM-Cyclin-1 10μg/ml,37℃培养3天;胰蛋白酶消化、传代,加入BM-Cyclin-2 5μg
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