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- 英文名:
人真皮成纤维细胞
- 库存:
999
- 供应商:
上海圻明
- 细胞类型:
详见说明
- 组织来源:
详见说明
- 物种来源:
详见说明
- 细胞形态:
详见说明
- 运输方式:
常温/冷冻
- 生长状态:
详见说明
- 规格:
T/25*1瓶
欢迎光临圻明生物细胞专场,我们拥有上千种类齐全的细胞资源库,让广大科研工作者买的放心,用的省心!
人真皮成纤维细胞哪里买传代建议一传二
1)当细胞汇合度达到85%以上时,可进行传代。
2)在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,收集瓶内的培养基;
3)向培养瓶内加入3ml无菌的1×PBS 后,水平放置培养瓶,使PBS能够浸润到培养瓶底面上所有的面积,吸弃PBS;
4)向瓶内加入消化液1ml,浸润底面后放入37℃ CO2培养箱中孵育1~2min;
5)孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起,若全部消化下来则直接向培养瓶内加入2ml含10%FBS的完全培养基中,将悬液吸入15ml离心管;
注:如还有部分细胞未消化下来,可采用分步消化:
① 准备一个无菌的15ml离心管,加入2ml含10%FBS的完全培养基;
② 将消化下来的细胞吸入①中的离心管内中和(避免吹打);
③ 向之前消化的培养瓶中加入1ml胰酶继续消化2min左右,轻拍培养瓶,95%左右细胞脱落后加入2ml含10%FBS的完全培养基中和,中和后的细胞悬液移入①中的离心管内。
6)1000rpm离心5min;
7)准备两个新的T-25培养瓶,各加入4ml完全培养基。
8)离心完成后,弃上清,用2ml完全培养基重悬离心细胞,将重悬后的细胞转入2个T-25培养瓶,每个培养瓶各1ml;
9)水平放置培养瓶,震荡混匀后,将培养瓶置于37℃,5%CO2培养箱中静置培养。

冻存 (细胞冻存建议每瓶T25冻一支)
1)~6)参照传代步骤
7)离心完成后,弃上清,用1mL冻存液重悬细胞沉淀,然后转入1.8ml冻存管中;
8)将冻存管转入填充满异丙醇的程序降温盒中,之后转入-80℃冰箱中过夜降温;
9)第二天,取出降温完成的序降温盒中的冻存管,尽快转入液氮罐中保存。

产品仅供科研不用于诊断治疗等其他用途。欢迎新老客户咨询订购人真皮成纤维细胞哪里买,其他相关产品
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文献和实验实验材料: 1. 正常动物皮肤 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2 3. 细胞培养瓶(T25) 4. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊 实验方法: 1. 取正常动物皮肤,置于小培养皿内,用PBS漂洗3-4次,以除去表面血污及毛发; 2. 将洗净的组织用眼科剪剪切成1mm3 左右大小,再用PBS漂洗3次; 3. 用眼科剪将组织块移至培养瓶瓶壁
美少女福音!Science 重磅报道,他们率先实现皮肤无疤痕愈合
增殖的可能。 图片来源:Science 随后,作者也通过标记位于皮肤不同位置的 ENFs,识别出了是位于皮肤深处真皮网状层的 ENFs 被激活产生了 EPFs。 图片来源:Science 在弄清楚 EPFs 的来源后,研究团队探究了是什么导致 ENFs 被激活产生了 EPFs。 由于存在于纤维组织中并负责纤维的改造与产生,成纤维细胞能够感受到纤维组织的力学特性,所以作者认为是受伤后皮肤力学性质的改变,导致了 EPFs 的激活。 通过在不同刚度的模拟组织中培养 ENFs 以及使用抑制剂阻断力学信号
min。6、洗涤:1 × PBS (pH 7.4 )洗涤3次 × 15 分钟,晾干。7、标记性抗体:加入荧光标记抗体,37℃孵育30min。洗涤:1 × PBS (pH 7.4 )洗涤3次 × 15 分钟,晾干。8、封片:封片剂封片。9、镜检:荧光显微镜下观察。六、注意事项1、选材注意时要将皮肤组织上的被毛去除干净,也可以使用还未长出被毛的乳鼠进行试验。2、注意尽量将皮片剪成(3-5)mm ×(10-15)mm大小,如太大则不利于消化,太小则不利于真皮、表皮的物理分离。3、过度消化损伤严重影响成纤维细胞
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