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- 英文名:
小鼠血管外膜成纤维细胞
- 库存:
999
- 供应商:
上海圻明
- 细胞类型:
详见说明
- 组织来源:
详见说明
- 物种来源:
详见说明
- 细胞形态:
详见说明
- 运输方式:
常温/冷冻
- 生长状态:
详见说明
- 规格:
T/25*1瓶
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小鼠血管外膜成纤维细胞哪里买传代建议一传二
1)当细胞汇合度达到85%以上时,可进行传代。
2)在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,收集瓶内的培养基;
3)向培养瓶内加入3ml无菌的1×PBS 后,水平放置培养瓶,使PBS能够浸润到培养瓶底面上所有的面积,吸弃PBS;
4)向瓶内加入消化液1ml,浸润底面后放入37℃ CO2培养箱中孵育1~2min;
5)孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起,若全部消化下来则直接向培养瓶内加入2ml含10%FBS的完全培养基中,将悬液吸入15ml离心管;
注:如还有部分细胞未消化下来,可采用分步消化:
① 准备一个无菌的15ml离心管,加入2ml含10%FBS的完全培养基;
② 将消化下来的细胞吸入①中的离心管内中和(避免吹打);
③ 向之前消化的培养瓶中加入1ml胰酶继续消化2min左右,轻拍培养瓶,95%左右细胞脱落后加入2ml含10%FBS的完全培养基中和,中和后的细胞悬液移入①中的离心管内。
6)1000rpm离心5min;
7)准备两个新的T-25培养瓶,各加入4ml完全培养基。
8)离心完成后,弃上清,用2ml完全培养基重悬离心细胞,将重悬后的细胞转入2个T-25培养瓶,每个培养瓶各1ml;
9)水平放置培养瓶,震荡混匀后,将培养瓶置于37℃,5%CO2培养箱中静置培养。

冻存 (细胞冻存建议每瓶T25冻一支)
1)~6)参照传代步骤
7)离心完成后,弃上清,用1mL冻存液重悬细胞沉淀,然后转入1.8ml冻存管中;
8)将冻存管转入填充满异丙醇的程序降温盒中,之后转入-80℃冰箱中过夜降温;
9)第二天,取出降温完成的序降温盒中的冻存管,尽快转入液氮罐中保存。

产品仅供科研不用于诊断治疗等其他用途。欢迎新老客户咨询订购小鼠血管外膜成纤维细胞哪里买,其他相关产品
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文献和实验liupeizc 请问哪位高手知道成纤维细胞的生长周期啊,更确切的是血管外膜成纤维细胞生长周期,谢谢! zhujoker 估计都没人做过,你如果需要观察其生物学功能,就自己做一次,也算原创了啊! freecell 这里有: http://www.currentprotocols.com/protocol/cb0201 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意
培养基。放入37℃,5%CO2培养箱中培养。72h后细胞从环内外生长迁出,环内为内皮细胞,环外为成纤维细胞。将动脉环除去后,可看到内膜面细胞集落与外膜面之间有明显的无细胞区界限,用玻璃针剔除成纤维细胞,得到纯的内皮细胞生长克隆。继续培养10~15d,此时FBS浓度为20%,形成细胞单层。 4、置于5%CO2孵箱中培养,每隔3天换液,培养时添加15% FBS,5~10μg/ml的内皮细胞生长因子(ECGF)以及100μg/ml的肝素。待细胞90%~95%融合时,0.25胰蛋白
(internal elastic membrane),由弹性蛋白组成,膜上有许多小孔。在血管横切面上,因血管壁收缩,内弹性膜常呈波浪状(图8-5)。一般以内弹性膜作为动脉内膜与中膜的分界。 (二)中膜 中膜(trnica media)位于内膜和外膜之间,其厚度及组成成分因血管种类而异。大动脉以弹性膜为主,间有少许平滑肌;中动脉主要由平滑肌组成。血管平滑肌纤维较内脏平滑肌纤维细,并常有分支。肌纤维间有中间连接和缝隙连接。许多学者认为,血管平滑肌是成纤维细胞的亚型,在中动脉发育中,平滑肌纤维可产生
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