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- 英文名:
大鼠肾近曲小管上皮细胞
- 库存:
999
- 供应商:
上海圻明
- 细胞类型:
详见说明
- 组织来源:
详见说明
- 物种来源:
详见说明
- 细胞形态:
详见说明
- 运输方式:
常温/冷冻
- 生长状态:
详见说明
- 规格:
T/25*1瓶
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大鼠肾近曲小管上皮细胞哪里买传代建议一传二
1)当细胞汇合度达到85%以上时,可进行传代。
2)在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,收集瓶内的培养基;
3)向培养瓶内加入3ml无菌的1×PBS 后,水平放置培养瓶,使PBS能够浸润到培养瓶底面上所有的面积,吸弃PBS;
4)向瓶内加入消化液1ml,浸润底面后放入37℃ CO2培养箱中孵育1~2min;
5)孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起,若全部消化下来则直接向培养瓶内加入2ml含10%FBS的完全培养基中,将悬液吸入15ml离心管;
注:如还有部分细胞未消化下来,可采用分步消化:
① 准备一个无菌的15ml离心管,加入2ml含10%FBS的完全培养基;
② 将消化下来的细胞吸入①中的离心管内中和(避免吹打);
③ 向之前消化的培养瓶中加入1ml胰酶继续消化2min左右,轻拍培养瓶,95%左右细胞脱落后加入2ml含10%FBS的完全培养基中和,中和后的细胞悬液移入①中的离心管内。
6)1000rpm离心5min;
7)准备两个新的T-25培养瓶,各加入4ml完全培养基。
8)离心完成后,弃上清,用2ml完全培养基重悬离心细胞,将重悬后的细胞转入2个T-25培养瓶,每个培养瓶各1ml;
9)水平放置培养瓶,震荡混匀后,将培养瓶置于37℃,5%CO2培养箱中静置培养。

冻存 (细胞冻存建议每瓶T25冻一支)
1)~6)参照传代步骤
7)离心完成后,弃上清,用1mL冻存液重悬细胞沉淀,然后转入1.8ml冻存管中;
8)将冻存管转入填充满异丙醇的程序降温盒中,之后转入-80℃冰箱中过夜降温;
9)第二天,取出降温完成的序降温盒中的冻存管,尽快转入液氮罐中保存。

产品仅供科研不用于诊断治疗等其他用途。欢迎新老客户咨询订购大鼠肾近曲小管上皮细胞哪里买,其他相关产品
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文献和实验肾小管通过分泌H+、重吸收HCO3-在调节机体酸碱平衡方面起着重要作用。近曲小管、远曲小管和集合管的上皮细胞都能够主动分泌H+,发生H+-Na+交换,达到排H+和重吸收NaHC03的目的。尿中的K+主要是由远曲小管和集合管分泌的。一般当有Na+的主动吸收时,才会有K+的分泌,两者的转运方向相反,称为K+-Na+交换。H+-Na+交换和K+-Na+交换有相互抑制现象。另外,远曲小管和集合管还能够分泌NH3, NH3与H+结合成NH4+排出,不仅促进了排H+,也能够促进NaHC03的重吸收
基葡萄糖苷酶(NAG)主要位于近端肾小管上皮细胞溶酶体内,线粒体内也有少量存在;丙氨酸氨基肽酶(AAP)来源于近曲小管上皮细胞刷状缘;碱性磷酸酶(AKP)及其同工酶在不同部位的近曲小管细胞含量丰富;γ谷氨酰转换酶(γ-GT)作为一种近曲小管刷状缘酶,对小管间质局部炎症性损害尤其是自身免疫性损害时增高明显。 但尿酶检测也有许多局限性 ①排出受生理活动影响较大,即不同个体间或同一个体在不同时间或不同状态时排出量变化很大; ②检测方法多,存在方法、试剂差异而难以标准化; ③检测前需进行
非特异性酯酶组织化学染色法 羧酸酯水解酶或称酯酶(esterase),是一类水解酯的酶,其作用是水解脂肪族酯和芳香族酯,催化反应式如下: 一般所指的脂酶是非特异性酯酶,无底物特异性。广义的酯酶包括特异性酯酶,有底物特异性。各种酯酶水解的底物和最适pH不尽相同。 非特异性酯酶主要定位于内质网和溶酶体,也可少量存在于线粒体和胞液内。它主要参与酯类代谢,也与蛋白质代谢有关。非特异性酯酶在胰腺外分泌部腺细胞、横纹肌运动终板及小肠上皮细胞呈强阳性反应;在肝细胞 、肾近端小管上皮细胞及结肠上皮细胞呈阳性
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