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- DM-FAM1029
- 上海
- 2026年01月16日
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6个月
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2-8°
- 供应商：
上海笃玛生物科技有限公司
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现货
- 规格：
50管/24样
乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl-CoA carboxylase，ACC)试剂盒
分光光度法 50管/24样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义
ACC在生物体内催化乙酰辅酶A羧化生成丙二酰辅酶A，是脂肪酸和许多次生代谢产物合成的关键酶。ACC的活性在一定程度上决定了脂肪酸的合成速度和含油量的高低。
测定原理
ACC能够催化乙酰辅酶A、NaHCO3和ATP生成丙二酰辅酶A、ATP和无机磷，通过钼酸铵定磷法测定无机磷的增加量来测定ACC活性。
需自备的仪器和用品
分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
生化试剂盒的通用测定步骤可分为 前期准备、试剂配制、参数设置、校准与质控、样本检测、结果计算 六大核心环节，具体细节如下：
一、前期准备
1. 试剂准备：检查试剂盒各组分（R1、R2、校准品、质控品等）是否齐全、无异常（如浑浊、沉淀、变色），按要求从储存环境取出，平衡至室温（通常 20~25℃，平衡时间 5~30 分钟，具体以试剂盒说明为准），轻轻摇匀备用。
2. 样本准备：确认待检测样本类型符合要求，已按规范完成采集与处理（如血清 / 血浆样本离心分离、组织匀浆制备、尿液离心去沉淀等）；若样本需稀释或预处理（如去除干扰物），提前完成相关操作。
3. 仪器准备：确认使用的生化分析仪 / 酶标仪等仪器符合试剂盒适用要求，提前开机预热，进行仪器清洁（避免残留污染），准备好所需耗材（如反应杯、移液枪头）。
二、试剂配制（如适用）
1. 即用型试剂：无需额外配制，平衡至室温后直接使用。
2. 需混合试剂：按试剂盒规定比例（如 R1:R2=4:1、3:1 等）准确混合试剂组分，现配现用，避免提前配制导致试剂失效。
3. 校准品配制：用指定稀释液（如试剂盒配套稀释液、生理盐水）将校准品稀释至所需浓度梯度（通常 3~5 个梯度，如 0、20、40、80、160 nmol/L），稀释后充分摇匀备用。
三、仪器参数设置
根据试剂盒要求及所用仪器型号，设置核心检测参数：
1. 基础参数：检测方法（终点法、速率法、两点法等）、孵育温度（通常 37℃）、反应时间（含孵育时间和检测时间）。
2. 波长参数：主检测波长（如 450 nm、540 nm，根据反应产物特征吸收峰确定），若存在背景干扰，需设置副波长进行校正。
3. 液量参数：明确试剂与样本的比例（如 R1 200 μL + 样本 20 μL，孵育后加 R2 50 μL），确保移液体积准确。
四、校准与质量控制（保障结果准确性）
1. 校准程序：将配制好的各浓度梯度校准品依次加入反应杯，按设置的参数进行检测，记录各校准品的吸光度值 / 吸光度变化率；以校准品浓度为横坐标（X 轴）、对应吸光度相关值为纵坐标（Y 轴），采用指定拟合方式（如线性回归、Spline 拟合）绘制标准曲线，要求相关系数 R²≥0.990（具体以试剂盒性能指标为准）。
2. 质控程序：同步测定高、中、低三个水平的质控品，检测完成后查看质控结果是否在规定靶值范围内；若超出范围，需排查试剂、仪器、操作等环节问题，解决后重新进行校准与质控。
五、样本检测
1. 按仪器参数设定的试剂 / 样本比例，依次向反应杯加入对应试剂和待检测样本，确保加样顺序正确（如先加 R1 和样本，孵育后再加 R2）。
2. 按规定的孵育温度和时间完成反应，避免反应不充分或过度反应。
3. 反应结束后，仪器自动读取各样本的吸光度值 / 吸光度变化率，记录原始数据。
六、结果计算与记录
1. 依据绘制好的标准曲线，结合样本的吸光度相关值，自动或手动计算样本中被测物的浓度 / 活性（如公式：被测物浓度 =（样本吸光度值 - 空白吸光度值）× 校准品浓度 /（校准品吸光度值 - 空白吸光度值））。
2. 记录检测结果，同时标注校准曲线相关系数、质控结果等关键信息，便于后续结果追溯与验证。
注意事项：
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文献和实验乙酰辅酶A羧化酶 acetyl-CoA catboxyla-se
乙酰辅酶 A羧化酶 acetyl-CoA catboxyla-se 催化乙酰辅酶 A＋ ATP＋ HCO3-→丙二酰辅酶 A ADP＋ Pi反应的生物素酶。广泛存在于生物界。此反应制约着脂肪酸合成第一阶段的速度。本反应由二个步骤组成，即利用 ATP把 CO2 固定在酶所结合的生物素上和把 CO2转移给乙酰辅酶 A的反应。大肠杆菌或植物中的这种酶可以区分为催化这二个反应的蛋白质和结合生物素的蛋白质，而动物或酵母中的这种酶则不能分开，动物的酶是一种变构酶，原体不显示活性，而聚
进行脱羧或加羧反应的酶。定义含混，有下列各种使用例子：（ 1）与脱羧酶相同；（ 2）亦称α -羧化酶，也有指丙酮酸脱羧酶的（ EC 4． 1． 1． 1）；（ 3）在重视脱羧酶逆反应生成羧酸的反应时，也称此酶为羧化酶，如磷酸烯醇丙酮酸羧化酶（ EC4． 1． 1． 31）：磷酸烯醇丙酮酸 CO2 →草酰乙酸 磷酸；（ 4）与 ATP等高能化合物的分解相偶联使底物羧化的一系列的酶（连接酶）。如乙酰辅酶 A羧化酶（ EC6． 4． 1． 2）：乙酰辅酶 A ATP CO2 →丙二酸
某一代谢系统所必需，且继续为该代谢系统以外的系统消耗进行补充的物质反应。例如为了三羧酸循环协调运行，必须经常接受乙酰辅酶A的草酰乙酸。但是这个物质和它的前体物质α -酮戊二酸等又作为氨基酸合成的原料被消耗，因此必须用某种方法补充所缺乏的草酰乙酸。这种反应，在动物进行丙酮酸羧化酶反应，在植物和细菌，则进行磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶反应，从而使草酰乙酸得到补充。
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