赛默飞世尔Thermo Fisher V-VIAL GLS

生物大分子的离心分离实例

35,000rpm ）或垂直管转头 300,000xg ， 20 ℃ 离心 12 小时（约 55,000rpm ） （ viii ） 离心后利用梯度仪或手工收集成 50 管（每管 100 μ l ）。 （ ix ） 对每管样品测定折射率至小数 4 位，测试过程中应保持样品温度为 20 ℃ ，根据折射率 RI 计算各管样品的密度 D 。 （ x ） 每管中加 1 毫升重蒸水，在 260nm 波长时分别测各管光密度（ OD ），如果 DNA 已做了同位素标记，那么还要对收集的样品分别做液体

HLA-I重链、轻链的制备（包涵体的制备）

，使其深度最大，但不要接触烧杯的底部。 （11）      将超声裂菌器裂菌1.5分钟，每次间隔0.5秒。 （12）      转移菌液至3个25 X 89mm Beckman 离心管中，在Beckman Cs-15R离心机中用FO 630 转头，以最大速度于4℃离心10分钟。 （13）      取50ul上清，标记为S1 ,置-20℃冻存。 （14）      弃上清，加1-2ml洗涤液I。 （15）      用搅拌棒将沉淀打散，加洗涤液I至15ml，继续

酵母双杂交筛选

2) 2ml 培养液转入20ml YPDA 中，此时OD600=0.2~0.3。 克隆数(cfu)X 总悬浮体积 涂板体积X 稀释度X 文库用量(μg) =cfu/μg DNA 100cfu X (5mlX103μl/ml) 100μl X 0.0001 X 100μg 第二章 酵母双杂交筛选 12 3) 培养约4~5 小时至OD600>0.6。 4) 用50ml 离心管收集菌液，Eppendorf Centrifuge 5810R(以下步骤均使用此离心 机