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赛默飞 C11875500BT RPMI 1640, 含L-谷氨酰胺和酚红,不含HEPES 缓冲液
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文献和实验性,一般与激素或其它物质起相互协同或加成作用。另一种常见的添加物就是血清替代物,目前已有许多可完全或部分替代传统培养液中血清成分的商业产品,其稳定性较好,但批次间仍有差别,产品的成分也不很确定。2、细胞培养基配制 2.1 干粉培养基原倍液的配制 1)配制过滤除菌的细胞培养基 1)阅读培养基使用说明,确定需要添加何种添加剂(如NaHCO3、L-谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等)。 2)根据所需将培养基全部倒入一容器中,用少量注射用水(20℃~30℃)将袋内残留培养基洗下,并入容器。加注射用水至总体
初代培养原理将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。仪器、材料及试剂仪器:培养箱(调整至37℃),培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱布、手术器械、血球计数板、离心机、水浴箱(37℃)材料:动物组织块试剂:1640培养基(含20%小牛血清),0.25%胰酶,Hank′s液,碘酒初代消化培养法1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化
清的DMEM培养12小时,然后予各种干预。最后予4℃预冷的75%乙醇固定后,送流式细胞仪以PI(碘化丙啶)检测。(2)谷氨酸诱导:配置含80μM-10mM终浓度的谷氨酸(经典用10mM)的DMEM不完全培养液(不含血清),处理24小时(6-24小时,可偏长一点)后,再予各种干预,最后送流式细胞仪测定细胞凋亡(有人要求在无血清培养基中先培养8-24小时后,再加含10mM谷氨酸的不完全DMEM培养液培养6-24小时。)(3)缺氧诱导:首先设置低氧环境,将培养箱内充入95%氮气代替空气,同时充入5%二氧
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