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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
武汉赛奥斯生物科技有限公司
- 库存:
99
- 生长状态:
悬浮生长
- 运输方式:
常温/干冰
- 细胞形态:
淋巴母细胞样,圆形
- 物种来源:
人
- 规格:
1×10⁶cells
P3HR-1 人B淋巴瘤细胞
产品编号:CL-566h
一、细胞特性
形态:淋巴母细胞样,圆形
生长特性:悬浮生长
含量:>1x10⁶cells
规格:T25瓶x1(常温运输)/2mL冻存管x2(干冰运输)
用途:本产品仅供实验室研究使用,不可用于动物或人类治疗或诊断用途
二、完全培养基及冻存液配制
1) 该细胞完全培养基为:80%RPMI-1640+20%热灭活FBS
2) 培养条件:气相:5%CO₂+95%AIR;温度:37℃;培养箱湿度:70%-80%。
3) 冻存液:90%血清+10%DMSO,现用现配。
三、收货须知
收货当天发现异常,请在 24 小时内及时联系客服,逾期视为收货良好!
冻存管形式:收货后及时置于-80℃冰箱保存,若长时间不使用,应过夜转移至液氮。
T25 形式:在无菌条件下,将培养瓶的全部内容物转移到离心管中,在125 x g转速下离心 5-10 min 后重悬细胞,转移悬浮细胞到新的 T25 瓶中,补加完全培养基到 10mL,放入培养箱中培养。请严格按照本说明操作,否则造成细胞失活等情形,不予提供补发服务。
细胞培养操作步骤
(一)细胞复苏
① 冻存管从液氮或-80℃中取出放入 PE 手套中,迅速没入 37℃水浴锅,摇晃冻存管加速溶解,以 1 分钟内全部溶解为宜;
② 在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有 9mL 完全培养基的离心管内,1000-1200rpm/min离 心 3-5 分钟,弃去上清液,用 1-2mL 完全培养基重悬细胞;
③ 将细胞悬液加入到含有 6-7mL 完全培养基的 T25 瓶中,放入培养箱中竖立培养。
(二)细胞传代
① 离心法:收集细胞,1000rpm条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将 细胞悬液按1:2 的比例分到新的含8mL培养基的T25瓶中。
② 半量换液法:可选用半换液方式,将T25瓶子竖起来,轻轻拍打两下,在培养箱静置10分钟,肉眼可见大部分细胞沉在底部,轻轻吸去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含8mL培养基的T25瓶中。
③ 注意培养基 pH 值变化和细胞密度,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到大于2×10⁶个/mL 时,重复传代操作或者冻存。
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文献和实验P3实验室是生物安全防护三级实验室。生物安全防护实验室根据微生物及其毒素的危害程度不同,分为4级,一级最低,四级最高。一级实验室一般适用于对健康成年人无致病作用的微生物;二级适用于对人和环境有中等潜在危害的微生物;三级适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物或其毒素;四级适用于对人体具有高度的危险性,通过汽溶胶途径传播或传播途径不明、目前尚无有效疫苗或治疗方法的致病微生物或其毒素。P3实验室分为细胞水平的和动物水平的两类,动物水平的又分为小动物水平和大动物水平。我国
一、隔离的设备1)需设置生物安全操作装置(第一级、第二级或第三级),且要做定期检查。2)为了处理重组体,而使用容易产生气雾的磨碎机、冷冻干燥器、超音波细胞打碎机及离心机等仪器时,需把这些仪器放置在安全操作装置中。但若机器已经有防止气雾外泄的装置,则不在此限。3)必须是有规划有管理的独立实验空间,并设有适当UV灯,以达灭菌效果。4)实验区域之入口应有缓冲室,其前后二扇门不能同时开启,而且应有更衣室的设计。5)实验区域内需有废水收集及灭菌之设备,并需放置高压灭菌器,以供污染物及废弃物之灭菌
luoqq1985 想请问一下这里有没有哪位会用MC1061/P3这种感受态的?因为我之前常用的是Top10和DH-5a以及JCM109,最近要新做一个蛋白的表达质粒,提示要用MC1061/P3这个感受态。所以我想知道这个感受态与其他的有何不同?实验时需要注意什么?谢谢 freecell 这个质粒来自何处?为何要用MC1601/P3这个感受态? luoqq1985 这个质粒是表达人的细胞
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