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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
Cricetulus griseus
- ATCC Number:
CRL-3307
- 细胞类型:
细胞系
- 肿瘤类型:
-
- 供应商:
武汉赛奥斯生物科技有限公司
- 库存:
999
- 英文名:
CHO INSR 1284
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
Adult
- 运输方式:
常温/干冰
- 器官来源:
仓鼠
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
上皮细胞样,短梭形
- 免疫类型:
-
- 物种来源:
仓鼠
- 相关疾病:
-
- 组织来源:
卵巢
- 规格:
T25瓶
产品编号:CL-087e
形态:上皮细胞样,短梭形,不规则形,边缘不规则,单层贴壁生长
生长特性:贴壁生长
培养条件:气相:95%AIR,5%CO2;温度:37℃;培养箱湿度:70%-80%
含量:>1x10⁶cells
规格:T25瓶x1(常温运输)/2mL冻存管x2(干冰运输)
用途:本产品仅供实验室研究使用,不可用于动物或人类治疗或诊断用途
完全培养基配制
该细胞完全培养基为:
90%F-12K + 10%热灭活胎牛血清
收货须知
收货当天发现异常,请在 24 小时内及时联系客服,逾期视为收货良好!
冻存管形式:收货后及时置于-80℃冰箱保存,若长时间不使用,应过夜转移至液氮。
T25 形式:收货后于培养箱静置2-3h,再对细胞进行常规操作。请严格按照本说明操作,否则造成细胞失活等情形,不予提供补发服务。
细胞复苏、传代、冻存操作
- 细胞复苏
② 在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有 9mL 完全培养基的离心管内,1000-1200rpm离心 5 min,弃去上清液,用 1-2mL 完全培养基重悬细胞;
③ 将细胞悬液加入到含有 5-6mL 完全培养基的 T25 瓶中,放入培养箱培养。
复活性:可复活,培养18h后观察细胞贴壁,48h密度达到80%。
- 细胞传代
② 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(可用吸管吸起些许胰酶轻轻吹打细胞层某处,肉眼可见细胞层脱落,即消化完成,否则继续消化),直接吸掉胰酶,加入 5-6 mL完全培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散;
③ 将细胞悬液按1:2 比例分到新的 T25 瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,置于培养箱中培养;
④ 注意培养基 pH 值变化和细胞密度,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%-90%时,重复传代操作或者冻存。
注意事项:
① 细胞具有密度依赖性,首次传代(密度达到 80%),建议 1:2 传代(保持细胞密度),且优先在T25瓶中。
② 密封培养瓶的话,处理完后放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松。
- 细胞冻存
① 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/mL;
② 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用细胞冻存液重悬细胞(推荐使用无血清细胞冻存液,货号:RC-0102),按每1mL冻存液含1×106~1×107个活细胞/mL分配到一个冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息;
③ 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
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文献和实验In vitro metabolic and mitogenic signaling of insulin glargine and its metabolites.
PLoS ONE 5:E9540-E9540(2010)
液终止消化。吹打下细胞,按所需稀释比例传代。我现在的CHO细胞状态不是很好,但是疯长,不知道为什么。所以每次传代时,我都是留一滴足够,差不多能稀释20倍了。
1、CHO细胞 CHO细胞即中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary),该细胞具有不死性,可以传代百代以上,是目前生物工程上广泛使用的细胞。全世界批准正式应用于人类疾病治疗或疾病预防的基因工程产品约有三十多种,其中只有一种(乙肝疫苗)是由酵母菌生产的,其余所有产品都是由CHO细胞和大肠杆菌生产的,大肠杆菌不能形成有活性的二聚体(如白介素2),也不具有糖基化的功能(如EPO),而CHO却具有如上的功能,因此CHO成为表达复杂生物大分子的理想宿主。另外CH0细胞在基因工程使用中
分子生物学、分子免疫学等学科的发展使基因工程疫苗具有越来越重要的地位。在基因工程疫苗研究的动物细胞表达系统中,最具代表性的就是中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary,CHO)。它是用来表达外源蛋白最多也最成功的一类细胞。本文就CHO细胞表达系统在疫苗研制中的应用做一综述。1、CHO细胞表达体系及其特点 CHO细胞属于成纤维细胞,既可以贴壁生长。也可以悬浮生长。目前常用的CHO细胞包括原始CHO和二氢叶酸还原酶双倍体基因缺失型(DHFR-)突变株CHO。近年来,为降低










