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- KA&M BIO
- 干扰沉默
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- 2025年11月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
at-20℃
- 英文名：
pLV2-U6-ATG5-shRNA3-EGFP-Puro
- 库存：
现货
- 供应商：
上海圻明
- 规格：
0.5-2ug
上海圻明生物优势供应植物系列、大肠杆菌系列、酵母系列、细胞病毒等质粒载体。公司可根据客户需求构建质粒载体。
pLV2-U6-ATG5-shRNA3-EGFP-Puro基本信息（网页仅供参考，详细图谱序列资料请咨询客服）：caagatgttggcccagaaggctgaggaaaaggagaaccattgtcccacaatgctccggcccctttcacatcgcacagtcacaggggcaaagcccctgaaaaaggctgtggtgatgcccctacagctaattcaggagcaggcagcatccccaaatgccgagatccacatcctgaagaataaaggccggaagagaaagctggagtccctggatgccctagagcctgaggagaaggctgaggactgctgggagctacagatcagcccggagctactggctcatgggcgccaaaaaatactggatctgctgaacgaaggctcagcccgagatctccgcagtcttcagcgcattggcccgaagaaggcccagctaatcgtgggctggcgggagctccacggccccttcagccaggtggaggacctggaacgcgtggagggcataacggggaaacagatggagtccttcctgaaggcaaacatcctgggtctcgccgccggccagcgctgtggcgcctccCTCGAGACCGGTGACTACAAAGACCATGACGGTGATTATAAAGATCATGACATCGATTACAAGGATGACGATGACAAGTGACCGGTaAGTTTAAACCGCTGATCAGCCTCGACTGTGCCTTCTAGTTGCCAGCCATCTGTTGTTTGCCCCTCCCCCGTGCCTTCCTTGACCCTGGAAGGTGCCACTCCCACTGTCCTTTCCTAATAAAATGAGGAAATTGCATCGCATTGTCTGAGTAGGTGTCATTCTATTCTGGGGGGTGGGGTGGGGCAGGACAGCAAGGGGGAGGATTGGGAAGACAATAGCAGGCATGCTGGGGATGCGGTGGGCTCTATGGCTTCTGAGGCGGAAAGAACCAGCTGGGGCTCTAGGGGGTATCCCCACGCGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGCGGGTGTGGTGGTTACGCGCAGCGTGACCGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTCTTCCCTTCCTTTCTCGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGGCTCCCTTTAGGGTTCCGATTTAGTGCTTTACGGCACCTCGACCCCAAAAAACTTGATTAGGGTGATGGTTCACGTAGTGGGCCATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGACGTTGGAGTCCACGTTCTTTAATAGTGGACTCTTGTTCCAAACTGGAACAACACTCAACCCTATCTCGGTCTATTCTTTTGATTTATAAGGGATTTTGGCCATTTCGGCCTATTGGTTAAAAAATGAGCTGATTTAACAAAAATTTAACGCGAATTAATTCTG
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文献和实验. Moreover, to improve the constructing and screening efficiency for the shRNA-expression recombinant clones, these four DNA vectors are further reconstructed by inserting a stuffer of puromycin resistance gene (Puro R ) between restriction enzyme Cla I and Hind III
：pCas9/gRNA1 载体本身不带筛选标签。我们用带有嘌呤霉素和 EGFP 标签的载体 pLV-EGFP（2A)puro 和 pCas9/gRNA1 载体共转染，再用嘌呤霉素筛选转染成功的细胞。 简要步骤 设计靶点→构建 pCas9/gRNA1 载体→pTYNE 验证靶点→pCas9/gRNA1 载体转染 293T 细胞→挑选培养细胞克隆→测序验证基因敲除 靶点设计和基因敲除载体构建 人 TP53 基因有多个 mRNA 和蛋白拷贝，2 个转录起始位点，以及多个
该载体在大肠杆菌中的复制。 U6启动子是确保目的shRNA转录，个人觉得转染的shRNA表达载体应该具有真核复制起点吧？！ 网上搜到一种RNAi载体pGO包含的序列：pUC复制起点pUCori、fl复制起点flori、细菌启动子P、卡那霉素基因Kan、HSV-TKPolyA、U6启动子U6promoter 和多克隆位点MCS，其特征在于还含有用于表达绿色荧光蛋白基因的转录元件，包括CMV启动子CMVpromoter、增强绿色荧光蛋白基因EGFP和 SV40PolyA
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