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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
—20℃
- 规格:
2×50ml
不同的标准品应根据其理化性质、贮存要求的不同选择适宜的贮存环境和条件,分别置于规定的位置。
常温保存:通常用于化学性质比较稳定的标准品,建议保存于干燥阴凉的地方。
+4度冷藏:用于常温下不是很稳定的物质,保存于冰箱冷藏室。
-20度冷冻:用于化学性质不稳定,常温下容易分解的物质。
-80度冷冻:一些具有活性的物质,需要保存于特定的-80度的冰箱。
商品属性:
| 产品名称 | DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒 | 产品编号 | A-RY5228 |
| 规格 | 2×50ml | 用途 | 仅用于科研 |
Western blot、免疫组化中的DAB显色主要由DAB孵育液、氧化剂组成,等量混合后使用,染色后呈棕色。—20℃,避光,12个月
贮存环境:
贮存室应尽量设置空调设施,保证室内阴凉、干燥、避光、通风,温度在25+-5℃,相对湿度在50~70%为宜。特殊品种要求严格按照规定的贮存条件妥善保存。
标准品应放在干燥器或其它适宜容器中保存,每一个干燥器或容器外应有区别于标准品编号的特殊编码,以示存放位置。干燥器置于专用的柜中,依次排列整齐,并由专人管理。
标准品贮存应由管理员每天上下午各检查1次温度、湿度并做记录。凡不符合规定要求的,应及时调整纠正。多雨季节时,保管员要增加检查频次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用
特点:
①权威,准确——货源全部来自国家权威机构或国际公认标准品、对照品公司;
②快捷,方便——签订购销合同当天发货,全国各地三天到货,实现一对一、门对门送货;
③可靠、放心——有技术专人负责售前售中和售后服务
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文献和实验性笔在组织周围画圈,然后滴加稀释好的一抗,如果做阴性对照实验,就在对照组的组织上滴加 PBS。加完一抗后于 4 °C湿盒中孵育过夜。(抗体的最佳稀释比应预先通过实验确定,时间控制在 15h 以上)。 PBS 冲洗切片 3 次,每次 3 min,吸水纸擦干切片后滴加辣根过氧化物酶标记二抗 ,37 ℃ 孵育 30 min。 信号检测 PBS 冲洗切片 4 次,每次 3 min,甩去 PBS 液体后吸水纸擦干切片,每张切片滴加新鲜配制的 DAB 显色液,显微镜下观察,阳性信号为棕黄色或棕褐色,时间
底物范围较广,包括二氨基联苯胺 (DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。 二氨基联苯胺/金属盐 DAB 是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在 DAB 中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑色,且在水及醇中稳定。DAB/金属盐染色应用的组织染色范围较广。 1. 需要的溶液和特殊设备 DAB,0.05 mol/L Tris 缓冲液 (pH7.6), 0.3% (W
或细胞中目的抗原表达水平低:可延长DAB显色时间或延长二抗孵育时间。 (3)试剂超过有效使用期:及时更换试剂。 (4)操作中,滴加试剂时缓冲液未沥干,致使试剂稀释:可每步滴加试剂前沥干切片中多余的缓冲液(但防止切片干燥)。 (5) 蛋白封闭过度:封闭时间不要超过 2h。 Q3:为什么出现高背景染色,怎么办? (1)一抗浓度过高:对抗体进行滴定以确定获得特异性反应的最佳浓度。 (2)显色过度:缩短显色试剂 DAB 孵育时间。 (3)洗涤不充分:适当增加抗体孵育后的浸洗次数和延长浸洗时间。 (4)封闭
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