Roche货号3707601001上海睿安生物β-葡萄糖醛酸

β-D-葡糖醒酸苷葡糖醒酸苷水解酶

Beta-葡萄糖醛酸酶, 又称 β-D-葡萄糖醛酸苷葡萄糖醛酸水解酶，是一种溶酶体酶，属于2 羰基水解酶家族的一员。 大肠杆菌 β-葡萄糖醛酸酶与 人 β-葡萄糖醛酸酶 有50%序列相似性，并且表现出相同的底物特异性。这两种酶都包含三个结构域：糖结合域、免疫球蛋白样 beta-三明治结构域和TIM桶状结构域。这些结构域对 β-葡萄糖醛酸酶的酶活性起着重要作用。酶的特征
大肠杆菌 β-葡萄糖醛酸酶基本不具有硫酸酯酶活性，只在裂解类固醇和苯并二氮卓结合物方便特别有效。
β-D-葡萄糖醛酸苷葡萄糖醛酸水解酶
EC 3.2.1.31

β-葡萄糖醛酸酶已被广泛用于研究和分析实验室，用于酶法水解类固醇 β-葡萄糖醛酸苷。β-葡萄糖醛酸酶被用于：

• 水解尿液（(pH 6.0–6.5)）中的类固醇结合物(葡萄糖醛酸苷)
• 用于兴奋剂检测
• 检测小剂量本二氮卓类。
• 在GC-MS、HPLC、免疫测定或其他分析方法前制备裂解葡萄糖醛酸苷的样品。

它还被用于血浆肠内酯、睾酮和表睾酮葡萄糖醛酸苷的水解。

葡萄糖醛酸化是新陈代谢的基本原理之一。提供给人体的许多物质都要经过代谢处理，包括在UDP-葡萄糖醛酸基转移酶（UGT）作用下与葡萄糖醛酸结合。β-葡糖苷酸，也称为β-D-葡萄糖苷酸，可催化葡萄糖醛酸基转移至许多生物学和具有药理学活性的内源性和外源性分子。与原来的分子相比，葡糖苷酸通常更易溶、毒性更小、且更易被人体排泄。为了分析这些存在于体液（如尿液和血浆）中的药物偶联物，必须对葡糖苷酸进行解偶。分析过程中，检测前的酶促水解对于实现高灵敏度必不可少。水解后，样品可通过质谱法、气相色谱法、HPLC、免疫测定法或其他分析方法进行分析。[6]

β-来自大肠杆菌的葡糖苷酸对β-葡糖苷酸具有高度特异性，能够非常快速地水解类固醇β葡糖苷酸以及裂解许多其他类型的葡糖苷酸，比如苯二氮、类╳鸦╳片活性肽和大(dà)麻素等。β-葡糖苷酸可用于生物液体（主要是尿液）中葡糖苷酸的酶促水解。用于掺杂的物质与葡糖苷酸结合，这意味着有效的掺杂分析通常依赖于由β-葡糖苷酸对结合药物分子进行酶促裂解。[6]

• 基于酶′的高比活性执行快速分析。
• 快速筛查类固醇、苯二氮、大(dà)麻素和，╳╳╳，，(ā)片。
• 节省时间，不需要清理反应或缓冲尿液就可以开始流程。

β-葡萄糖醛酸酶活性的国际单位是酶活性，在+25 °C条件下，当pH为7.0时，将4-硝╳基╳苯基-β-D-葡萄糖醛酸苷（4NPG）的对╳硝╳基╳苯╳酚的释放速率提高1μM。
Fishman单位以前使用过。这个单位是酚酞从葡萄糖醛酸化物（PPG）中的释放。无法通过比较类固醇β-葡萄糖醛酸苷不同制剂就PPG的活性来测量相对活性。许多制剂不会均等催化尿液中PPG、4NPG或各种类固醇β-葡萄糖醛酸苷的水解。基于以下考虑，选择4NPG作为标准底物：

• 两种底物的米氏浓度相似（对于4 NPG，K_M = 2 ×10^-4 M；对于PPG，K_M = 6 ×10^-5 M），但相应的水解速率不同：
• 4NPG水解速率约为PPG的5倍；
• 对PPG来说，底物过量会产生抑制作用；使用4NPG时，则没有发现这一点。

大肠杆菌β-葡糖苷酸基本上不具有硫酸酯酶活性，在裂解类固醇和苯二氮偶联物时特别有效。
仅用于生命科学研究。不用于诊断操作。