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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
38
- 英文名:
GVPC Agar Base
- 供应商:
上海西格
- 规格:
10个/包
| 产品名称 | GVPC琼脂平板(9cm) | 货号 | XG-PYJ9049 |
| 英文名称 | GVPC Agar Base | 产品规格 | 10个/包 |
| 用途 | 仅供科研实验 | 货期 | 现货 |
制备培养基的基本方法和注意事项:
1,配方的选定:同一种配方在不同著作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外,一般均应尽量收集有关资料,加以比较核对,再依据自己的使用目的,加以选用,记录其来源。 2,制备记录:每次制备均应有记录,包括名称,配方及其来源,和各种成份的牌号,最终ph值,消毒的温度和时间制备的日期和制备者等,记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的一同存放,以防发生混乱。
3,成分的称取:各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,最好一次完成,不要中断。可将配方置于傍侧,每称完一种成分即在配方面军做出记号,并将所需称取的药品一次取齐,置于左侧,每种称取完毕后,即移放于右侧。完全称取完毕后,还应进行一次检查。
4,各成份的混合和溶化:培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅,以防有微量铜或铁混入其中,使细菌不易生长。最好使用不锈钢锅加热溶化,可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时,可先用温水加热并随时扰动,以防焦化,如发现有焦化现象,该培养基即不能使用,应重新制备。待大部分固体成分溶化后,再用较小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸。如为琼脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中,因蒸发而丢失的水分,最后必须加以补足。
培养基的使用步骤:
1.琼脂培养基的融化
将培养基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高压锅中的蒸汽)融化。经过高压灭菌的培养基尽量减少重新加热的时间,避免过度加热。培养基融化后立即移开,室温静置片刻(约2min),以免玻璃容器发生破裂。
融化后的培养基放入47℃~50℃恒温水浴锅中保温,冷却到47℃~50℃所需的时间取决于培养基的类型、体积和在水锅里的分装量。融化后内培养基应尽快使用,放置时间一般不超过4h。剩余的培养基固后不得再次融化使用。特 别是灵敏性培养基,应根据相关标准,缩短融化后放置的时间。
将琼脂培养基倒入类似检测培养使用的独立容器中,插入温度计,记录并保存琼脂的融化温度。
加入样品的培养基应将温度调节到44℃~47℃,或按照相关标准调节温度。
2.培养基的脱气
必要时,在使用前将养基放到沸水浴或蒸汽浴中加热15min,加热时松开容器盖子;加热后盖紧盖子,并迅速冷却至使用温度。
3.添加成分的加入
对热不稳定的添加成分应在培养基冷却至47℃~50℃时加入,灭菌的添加成分加入前应冷却至室温,避免冷的液体会造成琼脂凝胶或形成片状物。将添加成分慢加入培养基并充分混匀,尽快分装到待用的容器中。
4.培养基的弃置
所有污染和未使用的培养基的弃置应采用安全的方式,并符合相关法律法规的规定。
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文献和实验试验。对照平板必须是阳性结果。当平板含有300个以上的粘质沙雷氏菌或枯草芽孢杆菌菌落时,即为阳性。 (二)试验样品保护检测验证 合格判定标准:每次试验中,在琼脂平板上粘质沙雷氏菌或枯草芽孢杆菌的菌落数不得超过5个。必须重复3次试验。对照平板必须是阳性结果。当平板含有300个以上的粘质沙雷菌或枯草芽孢杆菌菌落时,即为阳性。 (三)交叉污染检测验证 合格判定标准:从攻击侧壁到距离侧壁36cm之间的一些琼脂平板可以得到粘质沙雷氏菌或枯草芽孢杆菌菌落,它们用作阳性对照。每次
剂:5%石炭酸、2%碘酒、70%酒精、0.1%升汞。 4. 其他:直径0.6cm无菌圆形滤纸片、小镊子、接种环等。 【方法】 1. 将琼脂平板分为四等分,并在其底面做标记。 2. 用接种环取葡萄球菌琼脂斜面培养物,密涂于整个琼脂培养基表面。 3. 用小镊子夹取无菌小滤纸片,分别蘸取上述消毒剂(消毒剂不宜蘸得过多,防止外流)。平贴于各相应分区的中央,盖上皿盖,标明日期和试验者。 4. 置37℃培养18~24小时后观察各种化学消毒剂的杀菌作用。纸片周围无细菌生长的区域,称为
醋酸纤维膜电泳是一项简便而又迅速的方法。它的优点是:①电泳区带分离清楚,比琼脂平板电泳分辨率高;②可以定量;③样品用量少,只需要几微升即可。 (一)材料与试剂 1.pH8.6离子强度0.05巴比妥缓冲液 2.0.5%氨基黑染色液 3.透明液: 冰醋酸 3 份 95%乙醇 2 份 混合即可 4.醋酸纤维膜 (二)操作方法 1.将醋酸纤维膜条
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