G6PDH活性检测试剂盒(WST-8法)

碧云天的G6PDH活性检测试剂盒(WST-8法) (G6PDH Activity Assay Kit with WST-8)是一种高灵敏度的基于WST-8的显色反应，通过比色法来检测细胞、组织或其它样品中G6PDH (glucose-6-phosphate dehydrogenase)酶活性的检测试剂盒。
WST-8是MTT的一种升级替代产品，和MTT或其他MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。首先，MTT被一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解；而WST-8和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤。其次，WST-8产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。再次，WST-8比XTT和MTS更加稳定，使实验结果更加稳定。另外，WST-8和MTT、XTT等相比，线性范围更宽，灵敏度更高。WST-8和WST-1相比，检测灵敏度更高，更易溶解，并且更加稳定。
本试剂盒使用便捷。使用细胞、组织等的裂解液即可进行检测，无需分离纯化细胞、组织或其它样品中的G6PDH。
本试剂盒检测灵敏度高，线性范围宽。可以每孔含量低至0.05mU的G6PDH，在1mU/ml (0.05mU/孔)至100mU/ml (5mU/孔)之间呈现良好的线性关系。
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase，简称G6PDH或G6PD)可催化葡萄糖-6-磷酸(glucose-6-phosphate，G6P)转化为6-磷酸葡萄糖酸内脂(6-phosphogluconate, 6-PG)，这是磷酸戊糖途径(pentose phosphate pathway, PPP)的第一个步骤，也是该途径的限速步骤。磷酸戊糖途径对于NADPH (还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸，也称为还原型辅酶II)和戊糖的生成至关重要。NADPH对于通过GSH的再生来调控氧化还原平衡以及脂肪酸生物合成来说都至关重要。所以G6PDH的缺乏会导致由于不能生成NADPH而引起的一些疾病，如新生儿黄疸、非免疫性溶血性贫血等。
本试剂盒可检测样品中的G6PDH的酶活性，具体原理如下：G6P在G6PDH的作用下氧化生成6-PG，在这一反应过程中NADP⁺被还原为NADPH，生成的NADPH在电子耦合试剂1-mPMS (1-Methoxy-5-methylphenazinium Methyl Sulfate)的作用下将WST-8还原生成橙黄色的formazan，在450nm左右有最大吸收峰。反应体系中生成的formazan与样品中G6PDH的活性呈正比关系。WST-8法检测G6PDH的原理参考图1。

本试剂盒适用于检测细胞、组织以及其它适当样品(如血液、血清)中的G6PDH活性。
本试剂盒可以测定100个样品。

包装清单：

保存条件：
-20℃保存，一年有效。显色液(S0189-3)须-20℃避光保存。
注意事项：
经检测本试剂盒中的G6PDH (细菌来源)室温存放72小时或反复冻融5次不影响其酶活性。但对于不同物种的G6PDH是否能耐受长时间的室温存放或反复冻融须自行测试，初次检测时尽量使用新鲜制备的样品。
由于G6PDH提取液本身略显粘稠，以该提取液作为稀释液时，无论对标准品还是样品进行稀释，在稀释过程中务必确保稀释均匀，否则易造成实验数据产生较大波动。
在样品加样和混匀过程中，须尽量避免产生气泡，以免影响最终的吸光度测定。
如果需要测定样品中G6PDH的绝对活力而又不能非常严格地控制反应温度和反应时间，则每次检测都需要设置标准曲线。
如果样品溶液中G6PDH活性过高或过低，不在试剂盒的线性检测范围内时，可适当调整样品或者提取液的用量。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。