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- 2025年12月05日
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文献和实验这段做MTT走了不少弯路，后来看了园子里有许许多多的建议和指导，再做时结果好了很多，心里很是感激，于是把众多的帖子进行了总结，希望对后来者有所帮助！同时感谢各位前辈的良帖！！MTT大汇总实验前应明确的问题1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下，96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大，因此，在进行MTT试验前，要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间，以保证培养终止致细胞过满
treatments in 100 µl volume, store on ice. Label 96-well plate. Harvest effector cells using PBS + 2% EDTA, count . Will need > 10 x 106 effector cells. Standard setup: 50 µl effector (2 x 105 cells for E:T 20:1), 50 µl target (1 x 104 cells), 100
一、实验前应明确的问题 1. 选择适当的细胞接种浓度。 一般情况下，96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大，因此，在进行MTT试验前，要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间，以保证培养终止致细胞过满。这样，才能保证MTT结晶形成酌量与细胞数呈的线性关系。否则细胞数太多敏感性降低，太少观察不到差异。 2. 药物浓度的设定。 一定要多看文献，参考别人的结果再定
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