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- 文献和实验
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- 英文名：
PET Particles
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100
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百欧泰(biotyscience)
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文献和实验加热灭活酶。通过凝胶提取试剂盒纯化消化的pET-32α（+）载体骨架和从pMD18-T载体切下的基因片段。用T4 DNA连接酶在23℃下用pET-32α（+）载体骨架连接基因片段1小时，载体末端和插入末端的比例为1：3（fmol）。将10μl连接反应与100μl感受态大肠杆菌 BL21（DE3）在冰上混合10分钟，并将混合物在42℃下孵育90秒。加入800μlLB并在37°C下孵育40分钟。涂在含有100μg/ ml氨苄青霉素的LB平板上。在37°C孵育过夜。通过菌落PCR筛选插入物的存在或制备
Biotin labeling and hybridization of probe to chromosomes
quality) at 70 C for 2 min. Immediately transfer the slides into an ethanol series (70 %, 95 %, and 100 %, 5 min each at 20 C), and air dry the slides. Add 10 µl of the hybridization mixture to each slide and cover with an '18 x 18' mm
Preparation and purification of biotin-labeled probe for ISH
is collected in the 1.5 ml tube The final volume of probe should be close to 55 µl. Usually, 5 µl of such a biotin-labeled probe (1 µg/55 µl = 18 ng/µl) is enough for one slide, and the probe can be used to process 100 slides. The size of the probe
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