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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
北京百泰派克生物科技有限公司
- 服务名称:
iTRAQ、TMT、Label-Free
- 规格:
询价
研究蛋白质含量的技术主要分为标记和非标记两种策略,其中iTRAQ和TMT为体外标记蛋白定量,Label-Free为非标记定量技术。
iTRAQ/TMT/Label-Free是三种不同的蛋白定量技术:
iTRAQ(isobaric tags for relative and absolute quantitation)即同位素标记相对和绝对定量技术。iTRAQ技术通过同位素标记来实现蛋白质定量研究,经水解的蛋白质多肽N末端或赖氨酸侧链基团可以被同位素标记,通过高精度质谱仪串联分析,可同时对最多8个样品进行鉴别和定量。利用iTRAQ技术一次实验可实现多达8个样品蛋白质的高通量鉴定和定量,且该技术是在肽段水平上进行的体外标记,没有物种特异性限制,理论上可用于所有物种的蛋白质定量研究。
TMT(Tandem Mass Tag)中文名串联质量标签,其原理与iTRAQ基本相似,利用氨基酸N末端和赖氨酸残基与试剂标签之间形成共价结合实现对多肽的标记,然后通过串联质谱获得的离子峰强度和离子峰质荷比进行蛋白质的定性和定量分析。一次TMT最高可同时标记16种不同的生物样品,与iTRAQ相比,TMT的通量更高;TMT报告基团间最小分子质量差为6/1000Da,iTRAQ报告基团间最小分子质量差为1Da,因此TMT比iTRAQ具有更高的分辨率,降低了实验误差。
Label Free蛋白定量技术,是将未标记的样品蛋白进行酶解,再将酶解得到的肽段进行质谱分析,利用质谱分析软件对质谱数据进行分析以计算蛋白质的含量。可通过一级质谱得到的肽段峰强度、肽段峰面积以及液相色谱保留时间等数据信息来进行样品蛋白的定量分析。Label Free无需使用昂贵的试剂标签就可以对样品进行高通量的定量分析,投入产出比较高。此外,在鉴定蛋白质翻译后修饰时,Label Free还可避免由试剂标签导致的样品蛋白发生的结构变化,减少了实验条件带来的误差。
百泰派克生物科技采用Thermo公司推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪结合Nano-LC,提供基于eiTRAQ/TMT/Label-Fre的定量蛋白质分析服务技术包裹,您只需要将您的实验目的告诉我们并将您的蛋白寄给我们,我们会负责项目后续所有事宜,包括蛋白酶切、肽段标价、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析。
其他服务项目

优质检测平台
(1)基于生物化学、分子生物学、色谱的检测分析平台
该平台配备了Agilent 2100 生物分析仪、ProteinSimple凝胶成像系统、高效液相色谱系统,为蛋白质组学、代谢组学分析保驾护航,包括样品制备、分离纯化分子量测量、杂质表征表达研究等:
(2)基于质谱技术的蛋白质组学分析平台、代谢组学分析平台、蛋白测序平台
该平台配备了超高效液相色谱质谱联用,Orbitrap Fusion Lumos Tribri,Thermo Scientific Exploris以及氢气交换质谱仪配合机械臂为蛋白贡组学、代谢组学和蛋白测序提供了全面的分析手段,包括蛋白质和代谢物的分离、质谱分析、结构分析以及动态信息研究;
(3)生物药物表征平台
该平台配备了DSC-FTRR差示扫描量热仪与傅立叶变换拉曼光谱仪,氢气交换质谱仪配备机械臂,为生物药物表征提供了全面的分析手段,包括生物药物的分离、纯化、结构分析和动态信息研究:
(4)基于10x Genomics的单细胞分析平台
该平台能够完成基于10x Genomics单细胞分析平台的检测流程包括单细胞分选、cDNA合成、文库制备、文库质量检测、PCR扩增以及高通量测序;
(5)基于Fluidigm的单细胞质谱流式检测平台
采用基于Fluidigm Helios流式细胞仪(Mass Cytometry Systemfor Single Cell Analysis)用于单细胞质谱分析,该平台能够完成包括单细胞捕获、cDNA合成、实时定量PCR分析、目标区域扩增以及质谱流式细胞分析;
(6)基于高精度质谱的免疫多肽组学及免疫学检测平台
基于高精度质谱的免疫多肽组学及免疫学检测平台,能够完成包括多肽分离、纯化、合成、质谱分析、免疫学检测以及分子相互作用研究;
(7)生信云平台
基于生物信息分析方法的生信云平台,能够完成一整套的生物信息学解决方案,包括组学数据的质量分析、差异表达分析、差异表达物GO、KEGG、COG注释分析、聚类分析、相互作用网络等多层次网络和通路的分析。
百泰派克生物科技-生物制品表征,生物质谱多组学优质服务商
北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则,通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证,建立了完备的质量体系,数据冷热/异地备份,设备定期计量/期间核查,软件审计追踪,为客户提供一体化解决方案和技术服务,支持新药研发、药物申报注册和生产放行。
1.公司采用ISO9001质量控制体系,专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务;
2.获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务;
3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等;
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文献和实验行串联质谱分析,可同时比较4种或8种不同样品中蛋白质的相对含量或绝对含量。 iTRAQ技术特点: 不同样本标记之后混样,统一处理上机,减少了分别上机造成的实验误差,并利用同位素标签的丰度来检测,定量更准确,重复性更好; 由于需要标记试剂标记,因此成本相对较高; 通量高,在一次实验中最多可同时比较8个样品; 利用基于同一个参考样品的办法,可以进行多于8个样品的定量比较; iTRAQ的覆盖度高、灵敏度高。 Label-Free定量蛋白质组学分析 Label-Free定量,即非标记的定量
本节课程介绍了label-free定量蛋白质组学技术的原理及应用。主要包括:(1)以MS数据为例,系统介绍label-free技术进行蛋白质定量的技术流程和原理。(2)介绍免费的label-free分析套件—Maxquant和Perseus。(3)以免疫沉淀(IP)数据为例,展示label-free进行蛋白质互作定量的应用。(4)以数据为例,展示label-free在外泌体蛋白定量分析中的应用。
Label-Free Proteomics of Serum
In this chapter we describe a method to analyze human serum with the goal of discovering disease-related changes in the serum proteome. The methodology is based on the removal of the six most abundant serum proteins by immunoaffinity
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