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- BestBio贝博
- BB-41037-50T
- 上海
- 2025年07月11日
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大量
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贝博
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2-8℃
- 规格：
50T
细胞凋亡是细胞的基本特征之一，它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定和一些疾病发生过程等方面起着十分重要的作用。 在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。在体内，巨噬细胞可以识别翻转到细胞膜表面的PS 从而将这些程序性死亡的细胞清除，因此凋亡过程中并不伴随局部的炎症反应，而在细胞坏死的过程中则常常伴随着炎症反应。 AnnexinⅤ是一种分子量为35-36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的PS高亲和力特异性结合。PS 外翻发生在细胞核破裂，DNA 片段化以及凋亡相关蛋白出现之前，这使得Annexin V 与PS 的结合成为凋亡早期的一种重要检测标志事件
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文献和实验样品染色：
1. 离心收集悬浮细胞。离心机300-500g力，2-8°C，离心时间5分钟，弃培养基。
2. 用冷PBS洗涤细胞两次。（300g-400g，2-8°C，离心时间5分钟收集细胞）。
3. 用100ul 1X Annexin V结合液悬浮细胞，浓度大约为1-5 X 106 cells/ml。
4. 在细胞悬浮液中加入5ul Annexin V-AF 660染色液，轻轻混匀后于2-8°C避光条件下孵育5-10分钟。
5. 加入5-10ul PI染色液后轻轻混匀于2-8°C避光条件下孵育1-3分钟。
6. 加入400ul PBS或1X Annexin V结合液，轻轻混匀。
7. 立即用流式细胞仪检测。
