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- mlBio/酶联生物
- ml-G13122
- 国内
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 库存：
523
- 英文名：
DH10Bac大肠杆菌克隆菌株
- 运输方式：
快递运输
- 规格：
100μl
| 菌株名称 |
|
| 菌株品牌 |
酶联生物 |
| 细胞规格 |
100μl |
| 细胞储存 |
-20℃ |
| 基 因 型 |
F- mcrA ∆(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80lacZ∆M15 ∆lacX74 recA1 endA1 araD139 ∆ (ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG /pMON14272 / pMON7124 |
| 菌株抗性 |
Kan/Tet |
| 培 养 基 |
LB |
| 菌株类别 |
大肠杆菌 |
| 培养条件 |
37℃，有氧，LB |
| 质粒转化 |
42℃热激 |
| 保存方式 |
20%甘油，-20℃ |
| 基本应用 |
用于基因克隆 |
| 菌株简介 |
DH10Bac感受态主要用于生产重组杆状病毒分子（Bac-to-Bac杆状病毒表达系统）。DH10Bac菌株中含有父本杆粒 bMON14272 、辅助质粒 pMON7124 ：父本杆粒 bMON14272包含 mini-F复制子, 卡那抗性基因, attTn7 位点和 lacZα互补因子；辅助质粒 pMON7124 含有 tnsABCD区（tnsABCD region supplies the transposition proteins required for insertion of the mini-Tn7 from the donor plasmid into its target site on the parent bacmid），具有四环素抗性，在细胞扩增过程中丢失，但可提高供体质粒pFastBac转化后的基因转座效率。mcrA、mcrBC及mrr突变使DH10Bac菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA（Therefore , genomic DNA , both prokaryotic and eukaryotic, can be cloned efficiently in DH10Bac）。recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。φ80dlacZ∆M15 的存在使DH10Bac可用于蓝白斑筛选。 |
| 供应范围 |
仅供限于科研实验研究使用 |
| 运输方式 |
低温快递运输 |
| 菌株优势 |
酶联生物菌株库拥有200种菌株 , 遗传性状一致 |
| 特别说明 |
细胞购买/细胞培养/动物血清/实验服务/原代提取/菌株购买，请立即与酶联生物联系 |
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文献和实验相关专题 准备工作： ①制做选择平板LB+25 mg/l Kan。 ②核对好要转化的质粒 DNA，在15 ml Falcon tube 和cuvette（电转化用的石英样品槽，两面磨光，两面磨砂）标好质粒名称。将Falcon tube、cuvette、质粒DNA、SOC培养基按顺序对应置于冰上预冷或解冻。转化前将大肠杆菌（45 µl aliquot of E. coli DH10B Cell s）置于
系列）：高拷贝会导致大片段质粒复制压力大，易丢失或断裂，优先用低拷贝载体（如 pACYC184，拷贝数 10-15）或大片段专用载体（如 BAC 载体 pBeloBAC11，可容纳 100kb 以上片段，在大肠杆菌中稳定存在）； ④选择合适的连接方法，比如 Gibson 组装（无缝克隆）的方法更适合 10-20kb 大片段的连接，相比传统的 T4 连接的方法，成功率更高，操作更简便； ⑤选择重组缺陷型感受态，提高大质粒的转化效率，如 Stbl3、DH10B 等，此外转化方式也会影响转化
Mutagenesis of Viral BACs With Linear PCR Fragments (ET Recombination)
Principle steps of mutagenesis. (A) Preparation of electrocompetent bacterial cells for mutagenesis. Prior to mutagenesis the plasmid pKD46, encoding the recombination functions, is introduced into DH10B containing the viral BAC. In the next step
技术资料