- ￥2090 - 5290
- 华尔纳生物
- N-34351
- 武汉
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
详询
- 细胞类型：
产品说明/详询
- 肿瘤类型：
详询
- 供应商：
武汉华尔纳生物科技有限公司
- 库存：
详询
- 生长状态：
产品说明/详询
- 年限：
产品说明/详询
- 运输方式：
快递
- 器官来源：
产品说明/详询
- 是否是肿瘤细胞：
产品说明/详询
- 细胞形态：
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- 免疫类型：
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- 物种来源：
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- 相关疾病：
产品说明/详询
- 组织来源：
产品说明/详询
- 英文名：
人髓核细胞
细胞代次低，活性高，品质保证，提供全程7*24小时专业技术指导售后服务 （养不活无理由全额退款）
- 产品名称：
人髓核细胞
- 细胞形态：
长梭形细胞，不规则细胞
- 组织来源：
椎间盘组织
- 种属来源：
人
- 规格：
5×10⁵Cells/T25培养瓶
- 传代特性：
细胞特性确定传代
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一、细胞基本属性
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细胞名称
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人髓核细胞
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组织来源
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椎间盘组织
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商品货号
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ORCH420
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种属来源
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人
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产品规格
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5×105cells/T25细胞培养瓶 |
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细胞简介
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髓核，是乳白色半透明胶状体，富于弹性，为椎间盘结构的一部分，位于两软骨板与纤维环之间。由纵横交错的纤维网状结构即软骨细胞和蛋白多糖黏液样基质构成的弹性胶冻物质。
发育成熟的髓核是一个由软骨样细胞分散在细胞间质内，周围围绕着一个比较致密的胶原纤维网的含水球，位于椎间盘偏后位置，占推间盘横断面积的50%～60%；由于它的含水量很高，并和软骨终板紧密接触，是椎间盘接受经软骨终板主要营养途径渗透交换营养的主要部分。 下腰痛是临床常见病，其病因主要是椎间盘退变所致。椎间盘退变的主要机制首先是椎间盘内髓核细胞逐渐衰老、凋亡，并导致细胞外基质的化学成分和结构改变。
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培养基
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原代内皮细胞培养体系
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换液频率
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每2-3天换液一次
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生长特性
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贴壁培养
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细胞形态
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长梭形细胞，不规则细胞
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传代特性
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细胞特性确定传代
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消化液
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0.25%胰蛋白酶
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培养条件
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气相： 空气，95%；CO2 ，5%
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二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
在技术部标准操作流程下，建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 悬浮细胞处理
1)收集T25细胞培养瓶中的培养基至50ml离心管中，用PBS清洗细胞培养瓶1-2次，收集清洗液；
2)1200-1500rpm离心3min，弃上清，收集细胞沉淀；
3)加入5ml新鲜完全培养基，用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞；将分散好的细胞调整合适密度接种至培养器皿中，置于37°C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4)若遇到悬浮细胞团块较大，无法机械吹散时，向步骤2)中细胞沉淀添加0.25%胰蛋白酶消化液2mL至离心管中，用吸-管轻轻吹打混匀，37°C温浴2-3min，消化结束后，加入胰酶抑制剂(或血清)终止消化，用吸管轻轻吹打，分散细胞；1200rpm离心5min，弃上清，收集细胞沉淀；
5)加入5ml新鲜完全培养基，用吸管轻轻吹打混匀；按传代比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37°C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
6)待细胞状态稳定后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
4. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；
3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基(补加1%FBS，促进贴壁)重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
5. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通；由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
2)本产品未通过用于活体诊断的审核
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文献和实验37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； 二、新生SD大鼠心房肌细胞的α-actin免疫荧光鉴定：1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育
及保温效果会稍差；而水套式则利用浸泡在水中的电热丝加热包裹在箱体内胆外的水套来达到控温的效果，其升温慢但是保温的效果良好，即使短时间发生断电也不怕影响箱体内的细胞生长。3、倒置显微镜需要倒置显微镜的帮助。对于一些荧光免疫细胞实验（IF），则还需要购买倒置的荧光显微镜。4、纯水机/超纯水机细胞培养还需要超纯水系统，普通的纯水和蒸馏水是无法用于细胞培养的，而超纯水主要用于配置一些培养基和试剂，超纯水的进水可为自来水或二级纯水（质量好些的去离子水，电阻10兆欧左右），细胞培养用水除了超纯以外，最主要对内
以优化其 mRNA 结构，增加翻译效率 4、AAV（带荧光标记）体内感染后检测不到荧光或者荧光弱，可能是什么原因？ 可能的原因 解决方案 病毒滴度过低 重新测定病毒滴度 病毒失效 病毒颗粒在生产、保存或运输过程中可能受损，导致感染效率低或完全失效 检查病毒滴度；体外测试病毒的感染效果；重新包装病毒 对目标组织/细胞的感染效率低 选择组织/细胞特异性 AAV 血清型 荧光蛋白表达的问题 启动子选择不当：如果用于驱动荧光
