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武汉华尔纳生物科技有限公司
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- 英文名:
人肾足突细胞
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- 种属来源:
人
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
- 传代特性:
可传1-2代
- 产品名称:
人肾足突细胞
- 组织来源:
肾组织
- 细胞形态:
上皮细胞样
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一、细胞基本属性
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细胞名称
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人肾足突细胞
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组织来源
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肾组织
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商品货号
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ORCH252
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种属来源
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人
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产品规格
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5×105cells/T25细胞培养瓶
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细胞简介
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人肾足突细胞分离自肾组织;肾小球是肾元中的用于将血液过滤生成原尿的一团毛细血丛,被鲍氏囊所包裹,是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球内的微血管不像其他微血管,汇流入静脉,而是流入出球小动脉。在肾小球内,微血管受到高压,而加速了超滤作用(hyperfiltration)的进行。微血管中的血液经由超滤作用之后,形成滤液,渗入鲍氏囊内。肾小球与鲍氏囊合称为肾小体,肾小球的过滤速率便称为肾小球过滤率。足细胞(podocyte)即肾小囊脏层上皮细胞,它附着于肾小球基底膜(GBM)的外侧,连同GBM和毛细血管内皮一起构成了肾小球血液滤过屏障。足细胞特殊的解剖位置,使得其体内研究较为困难;又由于正常成年机体的肾脏足细胞是一种终末分化细胞,体外培养的原代细胞不能增殖。足细胞呈星型多突状,胞体较大,由胞体伸出许多突起,又称足突(FP),呈指状交叉复盖于GBM外表面,并通过黏附分子和蛋白多糖分子与GBM相连。足细胞在正常情况下可以分泌GBM的主要组成成分,IV型胶原和纤维连接蛋白(FN);在促肾纤维化引资等刺激下还能分泌具有降解GBM作用的基质金属蛋白酶(MMPs)和组织蛋白酶,从而在GBM的代谢平衡中发挥重要作用。足细胞之间邻近的足突相互交替,形成了许多30-40nm的裂孔,孔上覆盖一层厚4-6nm的裂孔隔膜,即肾小球足突间裂孔隔膜。后者是血浆蛋白通过脉管系统的最后屏障,对于维持肾小球滤过屏障结构与功能完整性发挥关键作用。
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包被条件
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鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
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培养基
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含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
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换液频率
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每2-3天换液一次
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生长特性
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贴壁
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细胞形态
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上皮细胞样
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传代特性
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可传1-2代
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消化液
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0.25%胰蛋白酶
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培养条件
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气相:空气,95%;CO2,5%
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文献和实验37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; 二、新生SD大鼠心房肌细胞的α-actin免疫荧光鉴定:1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育
及保温效果会稍差;而水套式则利用浸泡在水中的电热丝加热包裹在箱体内胆外的水套来达到控温的效果,其升温慢但是保温的效果良好,即使短时间发生断电也不怕影响箱体内的细胞生长。3、倒置显微镜需要倒置显微镜的帮助。对于一些荧光免疫细胞实验(IF),则还需要购买倒置的荧光显微镜。4、纯水机/超纯水机细胞培养还需要超纯水系统,普通的纯水和蒸馏水是无法用于细胞培养的,而超纯水主要用于配置一些培养基和试剂,超纯水的进水可为自来水或二级纯水(质量好些的去离子水,电阻10兆欧左右),细胞培养用水除了超纯以外,最主要对内
以优化其 mRNA 结构,增加翻译效率 4、AAV(带荧光标记)体内感染后检测不到荧光或者荧光弱,可能是什么原因? 可能的原因 解决方案 病毒滴度过低 重新测定病毒滴度 病毒失效 病毒颗粒在生产、保存或运输过程中可能受损,导致感染效率低或完全失效 检查病毒滴度;体外测试病毒的感染效果;重新包装病毒 对目标组织/细胞的感染效率低 选择组织/细胞特异性 AAV 血清型 荧光蛋白表达的问题 启动子选择不当:如果用于驱动荧光






