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人子宫成纤维细胞 原代细胞 （带荧光鉴定）

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  • ￥2090 - 5290
  • 华尔纳生物
  • N-01046
  • 武汉
  • 2025年07月14日
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    • 英文名：

      人子宫成纤维细胞

    人子宫成纤维细胞/人子宫成纤维细胞/人子宫成纤维细胞
    细胞代次低，活性高，品质保证，提供全程7*24小时专业技术指导售后服务   （养不活无理由全额退款）

    细胞蓝色图

    • 细胞形态：

      成纤维细胞样

    • 种属来源：

      人

    • 规格：

      5×10⁵Cells/T25培养瓶

    • 传代特性：

      可传5代左右；3代以内状态最佳

    • 产品名称：

      人子宫成纤维细胞

    • 组织来源：

      子宫组织


    人子宫成纤维细胞
    Human uterine fibroblasts
    一、细胞基本属性
    细胞名称
    人子宫成纤维细胞
    组织来源
    子宫组织
    商品货号
    ORCH054
    种属来源
    人
    产品规格
    5×105cells/T25细胞培养瓶
    细胞简介
    人子宫成纤维细胞分离自子宫组织；子宫是孕育胎儿的器官，位于盆腔中部，膀胱与直肠之间，其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持，这些结构受损或松弛时，可以引起子宫脱垂。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的子宫成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。子宫成纤维细胞的主要特征：①是子宫的重要细胞组成，在体外易于培养；②在子宫损伤后能修复和重塑子宫；③在子宫炎症时能有效控制炎症扩散。
    培养基
    含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
    换液频率
    每2-3天换液一次
    生长特性
    贴壁
    细胞形态
    成纤维细胞样
    传代特性
    可传5代左右；3代以内状态最佳
    传代比例
    1:2
    消化液
    0.25%胰蛋白酶
    培养条件
    气相：空气，95%；CO2，5%
     
    方法简介：实验室分离的人子宫成纤维细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。
    质量检测：实验室分离的人子宫成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以
    上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
    人子宫成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
     
    二、细胞培养状态
    发货时发送细胞电子版照片
    三、使用方法
    人子宫成纤维细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈成纤维细胞样，在技术部标准操作流程下，细胞可传5代左右；3代以内状态最佳；建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
    客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
    1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
    2. 贴壁细胞消化
    1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
    3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
    4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          
    3. 细胞收货脱落
    1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；
    3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
    4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
    5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
    4. 细胞实验
    因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
    四、注意事项
    1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
    2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
    3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
    4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通；由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
    5. 该细胞只可用于科研。
    1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
    2)本产品未通过用于活体诊断的审核 
    备注：由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同，以上方法仅供各实验室参考


    注意事项

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    图标文献和实验
    相关实验

    • 原代细胞的取材

      组织在含高浓度抗菌素（400单位/mL）甚至加入适量的两性霉素B或10%达克宁液的培养液内于4℃下存放2小时以上，再用PBS洗2~3次，以确保所取材料无菌。要用无菌包装的器皿或事先消毒好的带少许培养液（内含400单位/mL抗菌素）的小瓶等便于携带的物品来取材，所取材料应避免接触有毒有害的化学物质，如碘、汞等。（3）取材和原代细胞制作时，要用锋利的器械，如手术刀或剃须刀片切碎组织，尽可能减少对细胞的机械损伤。（4）要仔细去除所取材料上的血液（血块）、脂肪、坏死组织及结缔组织，切碎组织时应避免组织干燥

    • Cancer Cell：中山大学刘卓炜团队揭示膀胱癌成纤维细胞新亚群介导肿瘤干性和化疗抵抗

      Promote Cancer Stemness via WNT5A in Bladder Cancer 的研究成果，该研究在膀胱癌组织中首次鉴定出一类高表达尿素转运子（SLC14A1）的成纤维细胞新亚群。证实了干扰素信号可以诱导这一亚群的分化，并通过分泌 WNT5A 活化肿瘤细胞 β-catenin 蛋白及其下游通路，从而增强肿瘤干性和介导化疗抵抗。研究人员通过单细胞测序对膀胱癌患者的肿瘤组织和配对癌旁组织中的成纤维细胞进行了无监督聚类。除了常见的 iCAF 和 mCAF 外，还发现了一类 SLC

    • 原代细胞的培养与建系(一)

      组织应加入含10%二甲基亚砜的培养基，按细胞冻存方式于液氮中冷冻保存。（2）取材应严格无菌 所取标本材料应在无菌条件下进行，为了确保无菌，对所取材料若疑有污染的可能，应将所取组织在含高浓度抗菌素（400单位/mL）甚至加入适量的两性霉素B或10%达克宁液的培养液内于4℃下存放2小时以上，再用PBS洗2~3次，以确保所取材料无菌。要用无菌包装的器皿或事先消毒好的带少许培养液（内含400单位/mL抗菌素）的小瓶等便于携带的物品来取材，所取材料应避免接触有毒有害的化学物质，如碘、汞等。（3）取材和原代细胞

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    444 人阅读发布时间：2023-02-14 12:58

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