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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海酶联生物科技有限公司
- 库存：
450
- 英文名：
SK-N-SH细胞
- 运输方式：
快递运输
- 规格：
1*10^6
| 细胞名称 |
||
| 细胞品牌 |
酶联生物 |
|
| 细胞英文 |
SK-N-SH细胞 |
|
| 细胞规格 |
1*10^6 |
|
| 细胞冻存 |
液氮冻存 |
|
| 干冰运输 |
2ml冻存管 |
|
| 活细胞运输 |
T25瓶 |
|
| 培养基 |
冻存液基础培养基+20%FBS+10%DMSO |
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| 供应范围 |
仅限于科研实验使用，不可作为其它用途 |
|
| 存接收后处理 |
干冰运输，收到细胞后立即转入-80℃冰箱短暂中转或直接复苏 |
|
| 收到细胞后,发现干冰已经完全挥发、冻存管瓶盖破裂脱落,请立即拍照与我们联系 |
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| 复苏接收后处理 |
收到细胞后，请首先检查培养瓶是否破损或漏液，培养液是否混浊 |
如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照把图片发给我们 |
| 75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4-6h后，在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片 |
若有贴壁细胞脱落，可收集上清离心，将沉淀用新的培养基接种至新的培养瓶或培养皿中。 |
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| 建议收到当天不要消化处理，如果细胞长满90%，可选择传代处理 |
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| 您收到细胞3天内没有反馈相关问题，出现的细胞问题将不提供免费重发服务 |
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文献和实验刚开始养SK-BR-3时，细胞状态不是很好，贴壁也不均匀，于是开始想办法，考虑是不是吹打的不够，或是传得过多，或是其它的什么，后来发现的确如此，细胞的生长状态与传代的方法有很密切的联系。我的传代方法是：以50平方厘米培养瓶为例，待细胞长满瓶底70％－80％1 、吸除或倒掉瓶内旧培养基。2 、PBS 5ml加入培养瓶，轻轻晃动培养瓶，让PBS流遍细胞表面，倒掉。3 、PBS 5ml加入培养瓶重复洗一次，倒掉。4 、加入1ml胰蛋白酶消化液，轻轻摇动培养瓶，使消化液流遍所有细胞表面，然后置37度
，无法达到持续表达外源基因的目的。一般用转染试剂进行质粒转染，多是瞬时转染。非常好，你能区分什么时候需要构建稳转株吗？细胞：需要构建稳转株的，有这些类型：1. 长期在目的细胞中研究基因功能；2. 部分蛋白半衰期极长，瞬时 RNA 只能干扰表达，无法去除已经表达的目的蛋白，想要实现更好的基因干扰效果；3. 想要实验更精准，筛选拷贝数适量的细胞进行实验研究；4. 需要用诱导表达系统的，主要是一些致死基因或者是需要时空表达的；5. 需要用细胞做动物实验的，比如裸鼠成瘤等。以下实验就不需要构建稳定
因其在文库筛选中的成熟应用而最为常见。 --- 二、激活文库与敲除文库的关键差异 维度 KOUT 敲除文库 SAM 激活文库 目的 功能缺失（loss-of-function） 功能获得（gain-of-function） 宿主细胞 需 Cas9 稳转株 需 dCas9-SAM 系统稳转株 gRNA 靶区域 基因编码外显子 TSS 上游约 −400 至 −50 bp gRNA 骨架 常规 sgRNA 带 MS2 发夹的 modified sgRNA 典型读数 gRNA
技术资料
