PBS-T with EDTA, pH7.4(×10)-50

膀胱癌T24细胞传代

我养的是膀胱癌 T24细胞（贴壁的）心得如下：1、 T24长的非常快，传代一般1：5传，每4天需要再传。2、虽然是永生化细胞，也一定不要等细胞100%汇合再传代，多次这样细胞状态不好，球形增加，还不容易洗掉。3、要用胰酶（0.25%）--EDTA（0.01%）混合消化液消化好些，一般1分钟内呈球形，即可混悬细胞了。4、培养液用10%小牛血清的DMEM或1640都可以。步骤：吸净培养液， PBS洗2次，加消化液室温一分钟左右，要在显微镜下注意观察，不要过头，球形后，吸掉消化液，加1毫升培养

T7Select 噬菌体展示系统

、包装、表达和亲和掏洗的高质量试剂盒以及详细的优化操作步骤指导。大通量亲和淘洗T7极其稳定，在亲和掏洗时可以采用各种试剂以将噬菌体从固相结合物上释放下来，例如1% SDS，5 M NaCl，4 M尿素，2 M盐酸胍，10 mM EDTA，100 mM DTT，pH 4-10。高代表性文库构建与展示采用高效包装提取物和T7克隆试剂盒能轻易地构建大的展示文库。有高、中、低拷贝表达供选择用户可以根据表达和亲和掏洗(蛋白结合)的具体要求方便地选择相应的高拷贝或低拷贝表达载体: T7Select系统提供多种

免疫金银染色（IGSS）操作流程

（一）石蜡切片IGSS（1）切片脱蜡至水。（2）0.1%胰蛋白酶37℃消化20min或抗原修复20min（98℃），自然冷却至室温。（3）0.05mol/L（pH7.4）TBS洗3×3min.（4）l%EA（卵蛋白）15min,不洗。（5）适当稀释的特异抗体室温4h或4℃孵育20h,或37℃孵育1h.（6）0.05m01/L（pH7.4）TBS洗3×5min.（7）0.02m01/L（pH7.4）TBS（内含0.1%BSA）洗10min.（8）1%EA 15min,不洗，1:10~1:20稀释