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22
- 英文名:
Edinburgh Minimal Medium(EMM)
- 供应商:
上海联祖
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2×500mL
英文名称:Edinburgh Minimal Medium(EMM)
产品规格:2×500mL
发货周期:1~3天
产品价格:询价
| 货号 | 规格 | 发货期 | 用途 |
| LZ-PYJ5707 | 2×500mL | 1~3天 | 仅供科研实验 |
粟酒裂殖酵母是一种模式真核生物,用于研究细胞周期和染色体动态变化。这类酵母细胞通过从细胞顶部生长的方式维持细胞外形稳定,并且分裂时产生两个大小相同的子细胞。这些特点使得粟酒裂殖酵母在细胞周期研究中成为强大的工具。
EMM培养基(Edinburgh Minimal Medium),也称爱丁堡基础培养基,是一种合成基础培养基,用于粟酒裂殖酵母菌(Schizosaccharomyces pombe)的营养细胞生长,为之生长提供葡萄糖、矿物质、维生素、微量元素等。如需用于抑制NMT启动子培养,EMM培养基中可加入15μM硫胺素,对于中等程度的抑制,加入0.05μM硫胺素。腺嘌呤含量减少至10mg/L,用于观察ade6突变体的显红色现象。低葡萄糖EMM培养基用于原生质体制备和酵母转化。
缺氮EMM培养基即缺氮EMM培养基(EMM without nitrogen),通过氮缺乏诱导裂殖酵母的减数分裂,产生有性孢子。
缺磷EMM培养基(EMM without phosphate)即缺磷酸盐的EMM培养基,用于粟酒裂殖酵母菌的32P同位素示踪标记。与EMM相比,去除培养基中的Na2HPO4,并用2g NaAc.3H2O替代苯二甲酸氢钾。培养基pH需调整为5.5。
EMMG培养基用于粟酒裂殖酵母菌二倍体孢子液体培养。该培养基是在EMM培养基的基础上,用1g谷氨酸钠替换培养基中的氯化铵作为N源。
EMMS培养基额外加入山梨醇,用于研究裂殖酵母转化的nmt1启动子。
培养基的计数方法:
一、稀释涂布平板法(亦称活菌计数法)是一种常用的微生物计数方法,其原理是当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,可以推测出样品中大约含有多少活菌。这种方法操作简便,适用于菌体大小和质量都相近的类群,如细菌、酵母菌等的计数。计算公式为每克样品中的菌株数=C/V*M,其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。
二、显微镜直接计数法利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。这种方法不能区分死菌与活菌,但可以估算出1mL培养中液中细胞个数,计算公式为1mL 培养中液中细胞个数=小方格中细胞平均数×400 ×104×稀释倍数(个/mL)。显微镜直接计数法的缺点是不能区分死菌与活菌,因此计数到的细胞数包括了死亡的细胞数。
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培养基操作步骤:
一、用法:称取本品33.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,备用。
二、配料:首先,根据培养基的配方,准确称量各种成分,包括粉状和非粉状的成分,如肉膏等,放入烧杯中。
三、溶化:向烧杯中加入适量的水,然后搅拌以溶解各成分。对于含有琼脂的培养基,应注意防止外溢,并在溶化过程中保持搅拌。
四、矫正pH:在培养基溶解均匀并冷却至室温后,使用pH试纸测量pH值,然后根据需要加入酸或碱来调整至合适的pH值。
五、澄清过滤:使用滤纸或多层纱布对培养基进行过滤,以去除杂质。
六、分装:将制备好的培养基分装入试管内或三角瓶内,确保管(瓶)口塞上棉塞,以防止外界微生物污染。
七、灭菌:对分装好的培养基进行灭菌处理,通常是通过高压灭菌来确保无菌环境。
八、检定:灭菌后的培养基可以进行质量检定,以确保其符合使用要求。
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