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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
53
- 英文名:
Dog MSC Adipogenic differentiation kit
- 供应商:
上海联祖
- 规格:
2×200ml
| 中文名称 | 狗间质干细胞成脂诱导分化与染色试剂盒 | 英文名称 | Dog MSC Adipogenic differentiation kit |
| 产品规格 | 2×200ml | 发货周期 | 1~3天 |
| 货号 | LZ-PYJ5247 | 用途 | 仅供科研实验 |
本产品可用于狗骨髓、脂肪等组织来源的间充质干细胞的成脂诱导分化与染色,兼容诱导分化过程中的其他检测,如mRNA检测、蛋白表达检测、免疫组化检测等。
间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)是中胚层来源的多能干细胞,具有高度自我更新能力和多项分化潜能,体外在一定的条件下可以被诱导分化成脂肪细胞、成骨细胞、成软骨细胞。2006年国际细胞治疗协会(ISCT)将此三项检测指标确定为MSC鉴定的必检项目,以MSC为基础的研究报道均会对此三项指标进行鉴定。
在成脂分化作用下,MSC会先后诱导分化为前成脂细胞(preadipocytes)和脂肪细胞(adipocytes),后者聚集着大大小小的脂肪滴(lipid droplets)。油红O在脂肪中的溶解度大于其在染液中的溶解度,因而使脂肪着色,呈现红色或橘红色。被染色的脂肪滴数量和深度会受到多种因素的影响,例如细胞类型、细胞代数、分化时间和培养条件等。狗间充质干细胞成脂诱导分化与染色试剂盒包括成脂诱导培养体系所有成分以及鉴定所用的油红O染色液,提供了一种稳定有效的将狗间充质干细胞诱导分化成脂的方法。
诱导分化程序简单便捷。
诱导成脂细胞效率高。
提供诱导培养基及添加物、染色液等全套试剂。
保存:2~8℃,避光,避免反复冻融,收到后请按标签标示分开保存,有效期1年。
注意事项
本产品所有产品组分均为无菌包装,在使用过程中请注意无菌操作,避免微生物污染。
解冻后的血清出现少量絮状沉淀为正常现象,这些物质对产品质量无影响。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
一、狗间充质干细胞成脂诱导分化培养基A液的配制
2~8℃解冻一份狗间充质干细胞成脂分化专用血清、双抗、重组人胰岛素,室温解冻IBMX、罗格列酮、地塞米松,至完全溶解,轻晃摇匀;
用75%乙醇擦拭消毒试剂盒中各瓶/管表面。
将一份专用血清、双抗、重组人胰岛素、IBMX、罗格列酮、地塞米松全部加入一份恢复至室温的成脂诱导分化基础培养基中。可以吸取少量基础培养基润洗各管1~2次,尽量将所有产品组分全部加入到基础培养基中。
轻轻颠倒摇晃配制好的狗间充质干细胞成脂诱导分化培养基A液,使其混合均匀。
注意:试剂盒中包含2份基础培养基、专用血清、双抗、重组人胰岛素,只取其中1份用于本次配制。
简便 大多数无需高压灭菌即可使用
特异 目标菌落色泽鲜艳,易于辨识
可靠 经大量分离株验证,符合率高
快速 最快检测时间为24h
节省 大批量样本的处理和检测,可减少补充生化试验的时间和费用
标准化 显色培养基已经普遍得到FDA、AOAC等国外官方的认可,被逐步引入到各种国际和国家检验标准中
一、培养基颜色不正确
(1)含有酸碱指示剂的培养基,若颜色不正确,通常是由于pH不正确导致的,加热过度、错误的灭菌方式等都会导致此项问题。
(2)加热过度导致某些成分分解或糖焦化,如SC培养基(SC增菌液)加热过度会变红,含糖量高的培养基,加热过度通常会出现颜色加深,呈焦糖色或棕褐色。
(3)某些成分变质,如血液久置易变黑,制成的平板颜色偏棕黑色。
二、 培养基不凝固或凝固性差
(1)称量错误
(2)琼脂分布不均匀
(3)培养基pH不正确
(4)加热过度
(5)琼脂量不足
三、培养基产生沉淀
(1)某些培养基原本就含有不溶性沉淀,如TTB,MC培养基等,配方中含有大量不溶性碳酸钙。
(2)灭菌前未充分溶解,如Fraser培养基中含有大量磷酸盐,若灭菌前溶解不充足,灭菌后就会出现大量沉淀。
(3)pH不正确,偏酸或偏碱都有可能使培养基中的部分金属离子产生沉淀。
(4)水的纯度不够,天然水中含有较多的矿物盐离子,若未除净,则易与培养基中的磷酸盐反应生成沉淀。
(5)添加剂加入温度不正确,卵黄、血液等对温度敏感的添加成分,若加入时温度过高或温差过大,易出现凝块。
(6)称量错误。
(7)试剂加入顺序不正确。
鸡生长激素ELISA试剂盒Chicken growth hormone ELISA Kit,growth hormone,GH
仓鼠肿瘤坏死因子αELISA试剂盒HamsterTumor necrosis factor α ELISA Kit,Tumor necrosis factor α,TNF-α
绵羊生长激素ELISA试剂盒sheep growth hormone ELISA Kit,growth hormone,GH
牛ELISA试剂盒cattle nitric oxide ELISA Kit,n
胰岛素生长因子Ⅰ检测试剂盒 IGF-Ⅰ ELISA KitC4a ELISA Kit
雄激素结合蛋白检测试剂盒 ABP ELISA KitBcl-2 ELISA Kit
细胞角蛋白20检测试剂盒 CK20 ELISA KitNADPH ELISA Kit
天门冬氨酸转氨酶/谷草转氨酶检测试剂盒 GOT/GPT ELISA KitMMP-3 ELISA Kit
水通道蛋白4检测试剂盒 AQP4 ELISA KitTRAIL-R4 ELISA Kit
杀菌肽检测试剂盒 cecropin ELISA KitGATA4 ELISA Kit
牛免疫球蛋白MELISA试剂盒cattle Immunoglobulin M ELISA Kit,Immunoglobulin M,IgM
牛纤维蛋白原ELISA试剂盒cattle Fibrinogen ELISA Kit,Fibrinogen,Fbg
犬免疫球蛋白EELISA试剂盒Dog Immunoglobulin E ELISA Kit,Immunoglobulin E,IgE
犬胰蛋白酶原激活肽ELISA试剂盒Dog trypsinogen activation peptide ELISA Kit
超敏前列腺特异性抗原检测试剂盒 PSA-U S ELISA KitNADPH ELISA Kit
白细胞酯酶检测试剂盒 LE ELISA Kit6-OHDA ELISA Kit
β2糖蛋白检测试剂盒 β2-GP ELISA KitMBP/MBL ELISA Kit
Rho家族GTP酶1检测试剂盒 RND1 ELISA KitLF/LTF ELISA Kit
EJ抗体/抗甘氨酰tRNA合成酶抗体检测试剂盒 EJ/GlyRS ELISA KitASP ELISA Kit
AT丰富结合域1A检测试剂盒 ARID
狗间质干细胞成脂诱导分化与染色试剂盒煌绿肉汤增菌液基础 Brilliant Green Enrichment Broth Base 250g
最低营养V-B培养基(底层) 250g
MLCB寒天培地 MLCB Agar 250g
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文献和实验试剂 公司),二甲基亚砜(DMSO),苏木精染液,伊红染液;TGF-β1免疫组织化学染色试剂盒,DAB显色试剂盒。B5060EX二氧化碳培养箱(德国Heraeus公司产品),37XAZ倒置生物显微镜(上海光学仪器厂),Olympus光学显微镜,DG-3022型酶联免疫检测仪(南京华东电子管厂),YS-875A净化工作台。 方法 1 MTT法检测不同浓度的苦参素对NIH3T3细胞增殖的影响 用0.25%胰蛋白酶消化单层培养NIH3T3细胞,用含10
细胞生长抑制作用将处于对数生长期的Raji细胞稀释并按每孔2ⅹ104个细胞接种于96孔细胞培养板中,然后加入不同浓度的Fab’片段溶液,每组3个孔,置37℃,5%CO2环境中培养72 h。实验终止前4h每孔加入新鲜配置的MTT 磷酸缓冲液20 µl,继续培养4 h后将96孔板离心,弃掉上清,每孔加入DMSO 200 µl,然后振荡摇匀,于酶标仪测定各孔吸光度值。(3)Annexin-V染色试剂盒检测细胞凋亡采用宝灵曼试剂盒,按照说明书操作进行。(4)RT-PCR分析bcl-2基因的表达按照TRIZOL RNA
镜油为无荧光镜油;电源最好装稳压器,否则电压不稳不仅会降低汞灯的寿命,也会影响镜检的效果。 3. 免疫组化和免疫荧光结果分析:见第一场试验讲座。 案例一 DAB 染色后切片着色一片黄/背景深 背景 奥运会期间我们课题组研究生都在实验室做实验,许多从北京购买的试剂买不到,对我们的许多实验产生了很大的影响。我以前一直用中杉金桥的SP 三步法染色试剂盒,效果不错,在奥运会期间我准备做同批实验分不同批次酶免疫组化实验,第一批组化实验结果很好,抗体浓度感觉比较
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