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48
- 英文名:
TRYPSIN, 1:250
- 供应商:
上海联祖
- 规格:
25g
中文名称:胰蛋白酶(1:250)
英文名称:TRYPSIN, 1:250
产品规格:25g
发货周期:1~3天
产品价格:询价
| 货号 | 规格 | 发货期 | 用途 |
| LZ-PYJ4996 | 25g | 1~3天 | 仅供科研实验 |
胰蛋白酶(Trypsin)是一种普遍发现于脊椎动物消化系统的丝氨酸蛋白酶,能水解蛋白,以无活性的胰蛋白酶原(trypsinogen)的形式分泌于胰腺中。其切割肽链的位点主要位于赖氨酸或精氨酸的羧基端(二者紧接脯氨酸的情况除外)。胰蛋白酶包括两个亚基,α亚基(有2个多肽链构成)和β亚基(有1个多肽链构成)。其水解活性可被多种抑制剂抑制,包括:
有机磷化合物,如氟磷酸异丙酯;
来源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白酶抑制剂;
银离子;
特定蛋白酶抑制剂,如AEBSF、抗蛋白酶、抑肽酶、DFP、亮抑肽酶、PMSF、TLCK等;
基本信息
中文别名 胰蛋白酶,猪胰脏来源;
英文别名 Trypsin,porcine pancreas;Parenzyme;Tryptar;Trypure;Parenzymol;U-4858;
CAS号 9002/7/7
分子量 23.8kDa
外观 白色至类白色粉末
消光系数 E1%280=14.3
等电点 pI=10.5
溶解性 溶于水,几乎不溶于乙醇和甘油
比活力 >250U/mg
产品组分
胰蛋白酶(1:250) 25g
说明书 1份
保存:2~8℃,有效期2年。
如何配置培养基:
1、配制溶液
向容器内加入所需水量的一部分,按照培养基的配方,称取各种原料,依次加入使其溶解,最后补足所需水分。对蛋白胨、肉膏等物质,需加热溶解,加热过程所蒸发的水分,应在全部原料溶解后加水补足。
2、调节pH值
用pH试纸(或pH电位计、氢离子浓度比色计)测试培养基的pH值,如不符合需要,可用10%HCl或10%NaOH进行调节,直到调节到配方要求的pH值为止。
3、过滤
用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。用纱布过滤时,最好折叠成六层,用滤纸过滤时,可将滤纸折叠成瓦棱形,铺在漏斗上过滤。
4、分装
已过滤的培养基应进行分装。如果要制作斜面培养基,须将培养基分装于试管中。如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基,则须将培养基分装于锥形瓶内。
5、加棉塞
分装完毕后,需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是过滤空气,避免污染。棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作,不要用脱脂棉,以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。
6、制作斜面培养基和平板培养基
培养基灭菌后,如制作斜面培养基和平板培养基,须趁培养基未凝固时进行。
培养基操作步骤:
一、用法:称取本品33.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,备用。
二、配料:首先,根据培养基的配方,准确称量各种成分,包括粉状和非粉状的成分,如肉膏等,放入烧杯中。
三、溶化:向烧杯中加入适量的水,然后搅拌以溶解各成分。对于含有琼脂的培养基,应注意防止外溢,并在溶化过程中保持搅拌。
四、矫正pH:在培养基溶解均匀并冷却至室温后,使用pH试纸测量pH值,然后根据需要加入酸或碱来调整至合适的pH值。
五、澄清过滤:使用滤纸或多层纱布对培养基进行过滤,以去除杂质。
六、分装:将制备好的培养基分装入试管内或三角瓶内,确保管(瓶)口塞上棉塞,以防止外界微生物污染。
七、灭菌:对分装好的培养基进行灭菌处理,通常是通过高压灭菌来确保无菌环境。
八、检定:灭菌后的培养基可以进行质量检定,以确保其符合使用要求。
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文献和实验心后上清液用二层纱布过滤。滤液置250mL 烧杯 中,以过滤清液的体积为准,加入粉末状硫酸铵,搅拌溶解,使溶液硫酸铵饱和度为20%。放置 6h后,3 500 r/min离心20min,保存上清液待用,取沉淀。沉淀分别用适量95%乙醇洗涤过滤,再用丙酮洗涤,过滤。最后将沉淀置于表面皿上自然干燥,即得胰蛋白酶粗品Ⅰ。在上述离心上清液中,加入粉末状硫酸铵,搅拌溶解,使上清液溶液达到55%硫酸铵饱和度,放置 6h后,3 500 r/min离心30min,取离心沉淀,分别用适量95%乙醇、丙酮洗涤
样品:重组胰蛋白酶,比活 4500USP u/mg pro.,上海雅心生物技术有限公司,纯度如图 1 所示。BAEE,Sigma. 图 1. 重组胰蛋白酶的纯度的 SDS-PAGE 鉴定 1. 最适 pH 的研究 准备 pH 为 3~12 的底物 BAEE(0.25 mM),分别测定 rPT 纯酶液的活性,最后结果表示为测定数值占最高酶活的百分比。缓冲液成分依次为 25 mM NaAc-HAc (pH 3~6),25 mM Tris-HCl (pH 7~8),25
问:有人说白颜色胰蛋白酶的要比黄颜色的效果好,是吗?我近期买的胰蛋白酶倒是白颜色的,但是不能溶解在PBS中,呈细小的悬浮颗粒状,是GIBCO公司出产的。这会是什么原因呢?望各位师兄师姐回复。 答:以我们的经验确实是这样的,我们做过比较的是白颜色的比较好,究其原因我们认为是黄颜色的胰蛋白酶提纯不够,里面混有杂质所致。
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