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- 联祖
- LZ-PYJ4094
- 国产
- 2025年07月13日
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- 文献和实验
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57
- 供应商：
上海联祖
- 规格：
1mL*20支
英文名称：见说明
产品规格：1mL*20支
发货周期：1～3天
产品价格：询价
| 货号 | 规格 | 发货期 | 用途 |
| LZ-PYJ4094 | 1mL*20支 | 1～3天 | 仅供科研实验 |
培养基的计数方法：
一、稀释涂布平板法（亦称活菌计数法）是一种常用的微生物计数方法，其原理是当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，可以推测出样品中大约含有多少活菌。这种方法操作简便，适用于菌体大小和质量都相近的类群，如细菌、酵母菌等的计数。计算公式为每克样品中的菌株数=C/V*M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。
二、显微镜直接计数法利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。这种方法不能区分死菌与活菌，但可以估算出1mL培养中液中细胞个数，计算公式为1mL 培养中液中细胞个数=小方格中细胞平均数×400 ×104×稀释倍数(个/mL)。显微镜直接计数法的缺点是不能区分死菌与活菌，因此计数到的细胞数包括了死亡的细胞数。
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培养基操作步骤：
一、用法：称取本品33.0g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶，121℃高压灭菌15分钟，备用。
二、配料：首先，根据培养基的配方，准确称量各种成分，包括粉状和非粉状的成分，如肉膏等，放入烧杯中。
三、溶化：向烧杯中加入适量的水，然后搅拌以溶解各成分。对于含有琼脂的培养基，应注意防止外溢，并在溶化过程中保持搅拌。
四、矫正pH：在培养基溶解均匀并冷却至室温后，使用pH试纸测量pH值，然后根据需要加入酸或碱来调整至合适的pH值。
五、澄清过滤：使用滤纸或多层纱布对培养基进行过滤，以去除杂质。
六、分装：将制备好的培养基分装入试管内或三角瓶内，确保管（瓶）口塞上棉塞，以防止外界微生物污染。
七、灭菌：对分装好的培养基进行灭菌处理，通常是通过高压灭菌来确保无菌环境。
八、检定：灭菌后的培养基可以进行质量检定，以确保其符合使用要求。
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文献和实验，每天换液一次。 8、用心肌分化培养基（II）进行换液，放置在 37℃，5%CO2 的培养箱中培养 7 天，每天换液一次。 9、用心肌分化培养基（III）进行换液，放置在 37℃，5%CO2 的培养箱中培养 2 天，每天换液一次。 10、分化后，吸出原培养基，加入含 2% I 型胶原蛋白酶和 20% FBS 的 PBS 溶液（含 Ca2+ 和 Mg2+），消化 60min 后，加入 0.25% Trypsin-EDTA 再消化 10min。 11、加入 MEM 完全培养基（10%FBS
第一步细胞培养：外泌体来自于细胞，必须先从源头抓起，高质量的细胞及上清液产出高质量的外泌体。 收集上清的细胞培养原则：在细胞健康正常生长的前提下，尽可能的减少血清外泌体或是不使用血清。 培养条件 优点 缺点 1 含血清的完全培养基 ✘ 血清中含有大量异源外泌体 2 含去外泌体血清的培养基 ✔ 营养相对丰富 去外泌体血清难以做到 100% 的去除的，因此即使 1% 的血清外泌体残留也带来大量的异源外泌体 3 基础培养基
时间不宜超过 2min。 25、将细胞悬液转移至 15ml 离心管中，加入 10ml 预冷的 DMEM/F12 培养基（含 10% FBS）。4℃ 条件下 220g 离心 5min，取细胞沉淀。 26、将所得细胞重复 8-12 步骤，完成 OC 类器官复苏。 图 2. OC 类器官的不同形态表型。即致密（左），囊性（中）和低内聚（右）型 OC 类器官。比例尺 200 μm【4】。 卵巢癌类器官样本来源不局限于活检样本或手术样本，腹水和胸腔积液中的癌细胞也同样可以用于构建 OC 类器官。培养
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