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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20°C储存
- 英文名:
Anstart PCR Mix(2×)
- 库存:
期货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格:
A292317-500μl/A292317-250μl/A292317-1ml
| 规格: | A292317-500μl | 产品价格: | ¥689.9 |
|---|---|---|---|
| 规格: | A292317-250μl | 产品价格: | ¥411.9 |
| 规格: | A292317-1ml | 产品价格: | ¥1029.9 |
英文名:Anstart PCR Mix(2×)
纯度或规格:EnzymoPure™, Anstart Taq DNA聚合酶、反应缓冲液、Mg2+和dNTP 预先混合的浓缩溶液
SPU:A292317
CAS:-
存储温度:-20°C储存
运输条件:超低温运输
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文献和实验ThermoScript或AMV,以18S rRNA基因特异性引物,由10ng大豆总RNA在所示温度合成cDNA。将1/10的cDNA反应产物使用高保真Platinum Taq DNA聚合酶进行40个PCR反应循环。 表2. 逆转录保温温度 Reverse Transcriptase Incubation Temperature AMV 37°C-45°C M-MLV 37°C SuperScript™II RT
大于50mmol/L时可抑制Taq DNA聚合酶的活性.4种dNTP的浓度应该相等,以减少合成中由于某种dNTP的不足出现的错误掺入。3、 Mg2+:Mg2+浓度对Taq DNA聚合酶影响很大,它可影响酶的活性和真实性,影响引物退火和解链温度, 影响产物的特异性以及引物二聚体的形成等。通常Mg2+ 浓度范围为0.5-2mmol/L.对于一种新的PCR反应,可以用0.1-5mmol/L的递增浓度的Mg2+ 进行预备实验,选出最适的Mg2+浓度。在PCR反应混合物中, 应尽量减少有高浓度的带负电荷的基团
;再如引物退火,这会影响特异性。dNTP和模板同镁离子结合,降低了酶活性所需要的游离镁离子的量。最佳的镁离子浓度对于不同的引物对和模板都不同,但是包含200μM dNTP的典型PCR起始浓度是1.5mM(注意:对实时定量PCR,使用3到5mM带有荧光探针的镁离子溶液)。在多数情况下,较高的游离镁离子浓度可以增加产量,但也会增加非特异性扩增,降低忠实性(当然,也有相反的报道)。为了确定最佳浓度, 可以用0.1-5mmol/L的递增浓度的Mg2+ 进行预备实验,选出最适的Mg2+浓度。在PCR反应混合物中
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