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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20°C储存;避免反复冻融
- 英文名:
Tth DNA Polymerase
- 库存:
期货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格:
T292976-50μl/T292976-250μl/T292976-1ml
| 规格: | T292976-50μl | 产品价格: | ¥1441.9 |
|---|---|---|---|
| 规格: | T292976-250μl | 产品价格: | ¥4118.9 |
| 规格: | T292976-1ml | 产品价格: | ¥10298.9 |
产品说明
Tth DNA 聚合酶是一种热稳定性酶,分子量94kDa,用大肠杆菌重组表达从来源 Thermus thermophilus HB-8 的基因。该酶在74℃时可进行DNA 复制,在 95℃的半衰期为 20min。Tth DNA 聚合酶在镁离子存在的条件下可催化核苷酸沿 5`→3`方向发生聚合反应,形成双链 DNA,也可在锰离子存在的条件下,以 RNA为模板沿 5`→3`方向发生核苷酸聚合反应。该酶也具有 5`→3`外切酶活性。Tth DNA 聚合酶可用于 PCR、RT-PCR、逆转录和较高温度条件下的引物延伸反应。
产品内容
Tth DNA Polymerase ( 5U/μl )
2×Tth One Step RT-PCR Buffer(Mg2+ Plus) Mn2+(50×)
Mn2+(50×)
储存缓冲液
10mM Tris-HCl (pH 7.5,25℃), 300mM KCl, 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 50% 甘油
应用
1)RT-PCR
2)PCR
使用方法
1. 体系配置(50μl 体系)
组分 | 体积 | 终浓度 |
Tth DNA Polymerase(5U/μl) | 1μl | — |
2×Tth One Step RT-PCR Buffer | 25μl | 1× |
Mn2+(50×) | 1μl | 1× |
RNasin(40U/μl) | 1μl | — |
Primer-probe Mix | 3μl ※ | — |
模板 | 5μl ※ | — |
超纯水 | Up to 50μl | — |
总体积 | 50μl | — |
※ 注:引物、探针以及模板的用量可自行调整,体系不够请用超纯水补齐。
2. 反应条件
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
1 | 95℃ | 2.5min | 1 |
2 | 60℃ | 30min | 1 |
3 | 95℃ | 2.5min | 1 |
3 | 94℃ | 15s |
40※ |
4 | 55℃ | 40s(收集荧光) |
※注:反应条件根据引物探针和模板情况可自行设置。
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文献和实验Preparation of End-Labeled DNA Probes by Conventional Kinase for DNA Footprinting Analysis
, and centrifuge in a microcentrifuge at full speed for 5 min to pellet the DNA. Discard the supernatant. 7. Dry the DNA pellet by vacuum centrifugation. 8. Resuspend the pellet in 180 μl of ddH2 O. B. Calf Intestine Phosphatase
Preparation of End-Labeled DNA Probes by Conventional Kinase for DNA Footprinting Analysis
, and centrifuge in a microcentrifuge at full speed for 5 min to pellet the DNA. Discard the supernatant. 7. Dry the DNA pellet by vacuum centrifugation. 8. Resuspend the pellet in 180 μl of ddH2 O. B. Calf Intestine Phosphatase
Cetyltrimethylammonium bromide (CTAB) Plant DNA Extraction
on ice for 20 min. 13. Centrifuge at 1,000 X g for 5 min to collect the precipitate. 14. Discard the supernatant and dry the inside of the tube with a paper towel (do not dry the pellet). 15. Dissolve DNA in 900 μl of TE Buffer by gentle
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