- ¥249.90 - 3469.90
- 阿拉丁
- 上海
- T292917
- 2026年08月27日
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- 文献和实验
- 技术资料
- CAS号：
9014-24-8
- 保存条件：
-20°C储存,避免反复冻融；超低温运输
- 英文名：
T7 RNA Polymerase
- 库存：
现货
- 供应商：
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格：
T292917-1ml/T292917-250μl/T292917-50μl
| 规格： | T292917-1ml | 产品价格： | ¥3469.90 |
|---|---|---|---|
| 规格： | T292917-250μl | 产品价格： | ¥999.90 |
| 规格： | T292917-50μl | 产品价格： | ¥249.90 |
基本描述
产品名称：T7 RNA聚合酶
规格或纯度：BioReagent,通过内毒素测试,分子生物学级,EnzymoPure™,无RNA酶,重组,≥98.0%,50 U/μL
产品介绍：
T7RNA聚合酶是一种来源于T7噬菌体的一种依赖于DNA的RNA聚合酶，具有高度特异性的5'→3'端的RNA聚合酶活性。T7RNA聚合酶对T7启动子具有较高的特异性，能够以T7启动子下游序列为模板合成大量的RNA。
产品组分
|
使用说明
体系配制（50μl）
| 组分 | 体积 |
| Nuclease-free water/DEPC | Up to 20 μL |
| 10×HH T7 Buffer | 2 μL |
| ATP/GTP/CTP/UTP (100mM each) | 0.4 μL each (2mM each Final) |
| RNase inhibitor | 1 μL (40 U) |
| Inorganic pyrophosphatase | 0.5 μL (0.05 U) |
| T7 RNA Polymerase (50 U/μL) | 1 μL |
| Linearized template DNA | 1 μg |
10×HH T7 Buffer: 400 mM Tris-HCl (25℃，pH 8.20), 60 mM MgCl2, 100mM DTT, 20mM spermidine.
按以上顺序添加反应组分*10xHH T7 Buffer 只适用于 2mM 终浓度的NTPS 投料量，如需7.5mM-10mM 投料量，请选用高产试剂盒系列产品。
反应时间：37℃℃孵育2 h。
反应终止：加入2 μL 0.2 M EDTA (pH = 8.0@ 25°℃)或者 75°℃ 加热 10 min。
DNA 模板去除：可用 DNasel(2 U) 37°C处理 15 min。
质量控制
1) 核酸内切酶残留检测：50μL反应体系中加入50U本酶和1μgλDNA在37°C下反应16小时，琼脂糖凝胶电泳DNA谱带不发生变化。
2) 核酸外切酶残留检测：50μL反应体系中加入50U本酶和1μgλ-HindIIIdigestDNA在37°C下孵育16小时，琼脂糖凝胶电泳DNA谱带不发生变化。
3) 核酸切口酶残留检测：50μL反应体系中加入50U本酶和1μgpBR322DNA在37°C下孵育16小时，琼脂糖凝胶电泳DNA谱带不发生变化。
4) RNase残留检测：50μL反应体系中加入50U本酶和1.6μgMS2RNA在37°C下孵育16小时，琼脂糖凝胶电泳RNA谱带不发生变化。
5) 热失活：75°C，10min
注意事项
1、转录反应配制应在无 RNase 污染的环境中完成，操作过程建议佩戴手套。使用无核酸酶的水、吸头和反应管进行体系配制。
2、可以通过提高 NTP 浓度(每个浓度可达 10mM)，提高 RNA产量，同时需要适当增加Mg”浓度。
3、反应体系需要在室温下配制，避免在4℃时 DNA 与 10xHH T7 Buffer 发生反应产生沉淀。
4、模板 DNA 线性化不完全，可能降低转录产物产量和长度。
5、反应体系体积可根据实际需求按比例进行放大或缩小。
6、反应产物若出现下降，可向反应体系加入20 mM 新鲜 DTT。
7、转录片段≤500bp，建议延长转录时间为4-8 h.
8、10xHH T7 Buffer 冻存后容易产生沉淀在使用前请确认是否完全溶解，如果有沉淀产生，可于 37 ℃充分加热后摇晃复溶
9、10xHH T7 Buffer 只适用于 2mM 终浓度的 NTPS投料量，如器7.5mM-10mM 投料量，请选用高产试剂盒系列产品。
生物活性：50 U/μL
Accession #：
级别：重组, BioReagent, 通过内毒素测试, 分子生物学级, EnzymoPure™, 无RNA酶
产品规格参数
储存缓冲液：50mM Tris-HCl, 100mM NaCl, 20mM β-ME, 1mM EDTA, 50% Glycerol, 0.1%(w/v) Triton® X-100, pH 7.9
浓度：50 U/μL
储存条件：-20°C储存,避免反复冻融
运输条件：超低温运输
稳定性与储存：长期储存-20℃（24个月）；收货后建议分装，避免反复冻融。
CAS编号和信息：9014-24-8
酶学委员会编号：2.7.7.6
单位定义：在标准反应体系下，37°C 1小时内催化NTP生成1nmol的PPi所需要的酶量定义为一个活性单位(U)。
功能和特点
Accession #：
生物活性：50 U/μL
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文献和实验Expression Protocol in M9 Minimal Media via T7 Promoter
NaCl H2O to final 1L volume and autoclave To prepare 500mL M9 minimal media; 100mL of 5xM9 salts 1 mL 1M MgSO4 50 uL 1M CaCl2 5 mL 100x Basal Medium Eagle Vitamin Solution (Gibco) 2.5 mL filter sterilized NH
Expression Protocol in M9 Minimal Media via T7 Promoter
Expression Protocol in M9 Minimal Media via T7 Promoter The following protocol has been used successfully to 15 N or 13 C/15 N label our proteins using our pET1120/BL21(DE3) expression system: Preparing M9 minimal media begins
。pETcoco载体同时兼容了DE3调控模型， 在加入IPTG后诱导表达量达升高2500倍。 在保证质粒稳定性这一点上除了pETcoco的方法还有另一种方法就是 将重组质粒转化进入含有T7 RNA聚合酶抑制剂的T7溶菌酶表达基因的 菌株中，在含有pLysS的pLysE宿主菌内重组质粒的本底表达被进一步 抑制，质粒可以更稳定地存在。 Novagen提供多种表达使用的菌株，为了提高表达量做出了各种改 造，它们大致分为以下几个种类： 1. 蛋白酶缺陷型 所有B菌株的衍生株都是
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