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Taq酶抗体,EnzymoPure™, 5U/μl,阿拉丁

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  • 上海
  • T295097
  • 2025年07月15日
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    • 英文名

      Taq antibody

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    • 供应商

      上海阿拉丁生化科技股份有限公司

    • 规格

      T295097-200U

    产品简介

    Taq antibody 是抗 Taq DNA polymerase(货号:T295056) 的单克隆抗体,其与 Taq DNA polymerase 结合后抑制 Taq DNA polymerase 的聚合酶活性。Taq antibody 与 Taq DNA polymerase 的亲和力非常高,即使在 65℃下仍然可以封闭 Taq DNA polymerase 的活性,因此可以非常有效地抑制引物的非特异性退火及引物二聚体引起的非特异性扩增。Taq antibody 只需要在 95℃加 热 30 sec 即可完全失活,释放 Taq DNA polymerase 活性,适用于各种基于 Taq DNA polymerase 的热启动 PCR、qPCR 反应。


    使用方法

    将 Taq DNA Polymerase (5U/μl) (货号:T295056)和 Taq antibody (5U/μl) 等体积混合后,37℃下孵育 4 h,即为热启动型 Taq DNA Polymerase (2.5U/μl)。

    梯度测试确定反应比例

    1. 选择数对在 Taq DNA Polymerase 单独扩增时易于产生引物二聚体产生或者非特异性扩增的引物;

    2. 依据下表配制抗体与 Taq DNA Polymerase 反应体系(可依据需求进行进一步细化)


    3. 37℃孵育4h;

    4. 配制 PCR 反应体系,反应后进行凝胶电泳分析,判断最适反应比例。


    质量控制 

    a. 蛋白纯度:经 SDS-PAGE 电泳检测,蛋白纯度大于等于90%。

    b. 活性封闭检测,将封闭后的 Taq DNA Polymerase 在 50℃孵育 4 h, 活性释放 <5%。
    c. 热启动检测:将封闭后的 Taq DNA Polymerase 在 95℃孵育 30 s 后,≥95% 的聚合酶活性得到释放
    d. 核酸外切酶残留检测:将酶液与双链 DNA 底物在 37℃温育 16 h,通过 DNA 电泳检测双链 DNA 底物无变化。
    e. 非特异性内切酶活性检测:最适反应温度下,将 1 μl Taq antibody 与 1 μg 超螺旋质粒 DNA 共同温育 4 h,使用琼脂糖凝胶电泳检测,质粒 DNA 仍然处于超螺旋状态。
    f. 宿主残留检测:将酶液中残留的核酸经特异性的 TaqMan qPCR 检测,宿主基因组残留低于 10 拷贝。

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