- ￥897.90
- 阿拉丁
- 上海
- M665794
- 2026年04月21日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20°C储存;避免反复冻融
- 英文名：
miRNA qPCR Assay Kit
- 库存：
期货
- 供应商：
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格：
M665794-125T
产品内容：
|
产品简介：
本试剂盒采用SYBR Green I嵌合荧光染料法的原理来进行miRNA荧光定量PCR检 测。试剂盒包括检测所需的2×miRNA qPCR Mixture和Reverse Primer。 2×miRNA qPCR Mixture是专门为miRNA定量检测而研发的新一代预混形式的荧 光定量PCR检测试剂，所含的荧光染料SYBR Green I可以与所有的双链DNA结合，使 该产品可用于不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。其中的GoldStar Taq DNA polymerase是经化学修饰的高效热启动酶，配合独特的缓冲体系，使反应特异性更好， 灵敏度更高，并能在更广的范围内对miRNA进行准确定量。2×miRNA qPCR Mixture含 有ROX染料，适用于需要ROX作为校正染料的荧光定量PCR仪。
备注：本试剂盒须与miRNA cDNA第一链合成试剂盒配套使用。
自备实验材料：qPCR上游引物（Forward primer）。
Forward Primer设计原则：
1．遵循引物设计的最普遍原则。
2．以成熟的miRNA序列为基础，将U替换成T，这是最基础和最简单的设计方法。
3．试剂盒中提供的下游引物的Tm值为63.6℃，设计上游引物的Tm值要尽量保证在 63.6℃左右。
4．若按照原则“2”的方式直接设计的引物其Tm值过低，可以在引物的5’端添加几个碱 基（最好为G或C碱基）；也可以在3’端添加1个或几个A碱基；或者5’端和3’端同时 修饰。
5．若按照原则“2”的方式直接设计的引物其Tm值过高，可以在引物的5’或3’端去掉几个 碱基。
注意事项：
1．试剂使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2．miRNA 第一链cDNA 的加入量不要超过Real time PCR 体积10%。
3．对于特殊的检测体系，高含量的cDNA模板易导致非特异性扩增，根据所检测miRNA 的丰度适当的稀释cDNA（稀释10倍或者100倍）。
4．本产品中的2×miRNA qPCR Mixture中含有SYBR Green I和ROX染料，保存本产品 或配制PCR反应液时应避免强光照射。
5．避免反复冻融本品，反复冻融可能使产品性能下降，本产品长期保存可置于-20℃。 如果在短期内需要频繁使用，2×miRNA qPCR Mixture可于2-8℃保存。而Reverse primer仍需置于-20℃保存。
操作步骤：
1．室温融化2×miRNA qPCR Mixture和Reverse primer（10 μM）。
2．使用时请将2×miRNA qPCR Mixture上下颠倒轻轻均匀混合，避免起泡，并经短暂离 心后使用。如果试剂没有混匀，其反应性能会有所下降。
3．将试剂置于冰上，并按下表配制反应体系：
|
4．反应程序设置如下：
注意！本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成！
 |
注意：
1）本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2）退火温度请以60-64℃作为设定范围的参考，发生非特异性反应时，可提高退火温度。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验分子的RNA（200nt以上），小分子RNA往往被淘汰掉，因而不适用于小分子RNA的分离纯化。有机溶剂抽提能够较好的保留小分子RNA，但是后继的沉淀步骤比较费时费力。MirVana miRNA Isolation Kit是采用玻璃纤维滤膜离心柱(glass fiber filter，GFF)，既能够有效富集10mer以上的RNA分子，又能够兼备离心柱快速离心纯化的优点，是一个不错的选择。对于特别稀有的分子，由于需要分离大量RNA而导致高背景而降低灵敏度，还可以进一步富集10mer到200bp的小分子RNA
1, For cells cultured in 2D, about 1-2X107 S1 cells were growth in 100mm dish, and were cross-linked by adding formaldehyde to final concentration of 1% and incubated in room temperature for 10 minutes. For cells growth in 3D, cells
RT-PCR 和 qPCR 是大多数实验汪在科研道路上需要做的实验，大家看到这儿一定不以为意，这不就是两个简单的小实验，看两次 protocol，后面都不需要操作指南也能记住步骤的。可是…记住了实验步骤就真的等于能做好实验？能得到想要的数据、漂亮的曲线吗？ 看似简单的实验，实则暗流汹涌，稍不注意的地方就可能有旋涡把实验前进的小船打翻，要不怎么会有那么多人为此悲催的实验结果整日愁眉苦脸，屡战屡败，屡败屡战……最后还是得战战战！ 其实，多注意点小细节就可能帮助实验汪们减轻这样的苦恼，少做
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
