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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8°C储存;避光
- 英文名:
Four canions mixed standard (Calcium, Magnesium,Sodium,Ammonium)
- 库存:
期货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格:
BWW292898-50ml/BWW292898-100ml
| 规格: | BWW292898-50ml | 产品价格: | ¥308.9 |
|---|---|---|---|
| 规格: | BWW292898-100ml | 产品价格: | ¥514.9 |
量值信息
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文献和实验消化细胞,稀释到4000细胞/ml。4. 在6孔板的每孔中加入100μl细胞悬浮液,每孔中已预先加入2ml含稀释GENETICIN抗生素的培养基。将培养板在湿润的5%CO2中37℃温育。每周使用含GENETICIN抗生素的新鲜培养基更换培养基两次。5. 在10到14天,除去培养基,使用含钙离子和镁离子的D-PBS清洗细胞。使用溶于50%甲醇的0.5%亚甲基蓝染色细胞20分钟。6. 确定杀死所有细胞的GENETICIN抗生素最低浓度。使用紧邻的稍高的浓度进行筛选。转染和筛选:1. 使用含编码抗生素抗性
能将乙醇吸尽, 随后于室温放置几分钟,晾干沉淀。切勿抽干沉淀,因为干的核酸沉淀很难溶解。 (4)每个直径为90mm的培养皿或每107细胞加200μl 50mmol/L Tris.Cl( pH7.8)1mmol/L EDTA(pH8.0)溶液重溶沉淀。 (5)分别按10mmol/L和0.1mmol/L的深度加MgCl2和二硫苏糖醇(DTT),然后分别按1000单位/或10mmol/L 的终深度加台盘RNA酶抑制剂或氧钒核苷复合物。 (6)加入无RNA酶的胰DNA酶I至终浓度为2μg/ml,混匀
,其余3种分别溶解于50mmol/L Tris·Cl (pH7.5)溶液中,浓度为0.3mmol/L。③[α-32P]dCTP或[α-32P]dATP 400 Ci/mmol, 10μCi/μl。④ E.coli DNA聚合酶Ⅰ(4U/μl)溶于50μg/ml BSA,1mmol/L DTT,50%甘油,50mmol/L Tris·Cl(pH7.5)中。⑤DNA酶Ⅰ1mg/ml。⑥EDTA 200mmol/L(pH8.0)。⑦10mol/L NH 4Ac。 2. 方法 (1)按下列配比混合:未
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