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- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
A synthetic peptide derived from human Inhibin beta A (AA 67-80)
- 亚型:
Rabbit IgG
- 保存条件:
-20°C储存,避免反复冻融;超低温运输
- 库存:
现货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 浓度:
0.2 mg/mL
- 规格:
Ab110625-100μl/Ab110625-10μl/Ab110625-1ml/Ab110625-50μl
| 规格: | Ab110625-100μl | 产品价格: | ¥2099.90 |
|---|---|---|---|
| 规格: | Ab110625-10μl | 产品价格: | ¥374.90 |
| 规格: | Ab110625-1ml | 产品价格: | ¥16999.90 |
| 规格: | Ab110625-50μl | 产品价格: | ¥974.90 |
基本信息
产品名称:Recombinant Inhibin beta A Antibody
规格或纯度:ExactAb™, Validated, 重组, 0.2 mg/mL
应用:WB
特异性:INHBA
种属反应性:人(Human), 小鼠(Mouse), 大鼠(Rat), 仓鼠(Hamster)
免疫原:A synthetic peptide derived from human Inhibin beta A (AA 67-80)
阳性对照:WB: Mouse brain, SK-OV-3, HeLa, U-2 OS and C6 lysates.
偶联:Unconjugated
产品属性
克隆类型:重组抗体
Format:Whole IgG
亚型:Rabbit IgG
SDS-PAGE:150 kDa
纯化方法:Antigen affinity purified
物理外观:Liquid
储存缓冲液:50mM Tris-Glycine, 150mM NaCl, 40% Glycerol, 0.05% BSA, 0.01% Sodium azide, pH 7.4
防腐剂:0.01% Sodium azide
浓度:0.2 mg/mL
储存条件:-20°C储存,避免反复冻融
运输条件:超低温运输
稳定性与储存:4°C 短期储存(1-2 周)。-20°C下长期保存(24个月)。收货后建议分装。避免冷冻/解冻循环。
功能和特点
宿主种属:兔(Rabbit)
种属反应性:人(Human), 小鼠(Mouse), 大鼠(Rat), 仓鼠(Hamster)
偶联:Unconjugated
图片
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Recombinant Inhibin beta A Antibody (Ab110625) - Western Blot
All lanes: Recombinant Inhibin beta A Antibody (Ab110625) at 1/1000 dilution
Samples: Lysates at 20 µg per lane
Secondary: Goat Anti-Rabbit IgG H&L (HRP) (Ab170144) at 1/30000 dilution
Predicted band size: 47 kDa
Observed band size: 46 kDa
Exposure time: 39.4 s
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文献和实验洗涤一次。菌体洗涤可以去除一些培养基中的杂质,及代谢产物,减少对后续纯化的影响。如果菌体已经冻存过,冻融的菌体可能有部分破碎,就不要洗涤菌体了。 小量菌体的悬浮可以用5ml的枪头吹打,再磁力搅拌。大量菌体的悬浮可以用分散乳化机。破菌缓冲液的用量一般为1∶10—1∶20,即1g湿菌体用10—20ml的破菌缓冲液。 (2)破菌缓冲液的选择 选择何种破菌缓冲液,应该与后续的纯化方法密切相关,不能一刀切。而且,破菌缓冲液还与是否可溶表达相关。对于可溶表达的重组蛋白,一般就选用第一步层析纯化的平衡
蛋白洗脱下来,但是洗脱峰很拖尾,纯度虽然好一些,可收样体积要大许多,收率也略低。 250mM咪唑洗脱杂蛋白不是此工艺中的要点。实际上,我们在操作过程中往往没有此步骤,就直接用EDTA将柱脱镍再生了。 镍柱在上样后的缓冲液淋洗阶段,峰往往很拖尾,要耐得住性子,让它淋洗完全。 此柱的融合蛋白载量大约为20mg/ml。不同的镍柱,不同的蛋白,载量也是不同的。 经过一步Chelating Sepharose FF纯化,融合蛋白的SDS-PAGE纯度大约为90%。(3)Sephadex G-25
苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且应该在破碎的同时多加几次;另外,还可通过选择pH、温度或离子强度等,使这些条件都要适合于目的物质的提取。 这是标准配方: 裂解液:50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在这个pH范围内比较好发挥作用) 但我个人的经验是:如果你裂解细菌是为了提取蛋白的话,而且蛋白的分子量又小于20kd的话,尽量减少溶菌
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