海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒，阿拉丁

真核基因表达调控研究常用的方法是进行报告基因的检测，生物发光法又是报告基因检测最常用的有效手段。萤光素酶能催化底物萤光素的转化，并发射出光子。该产品为海肾萤光素酶报告基因在哺乳动物细胞中的表达提供快速、灵敏、稳定的检测方法。

产品特点：

1. 快速：细胞裂解在 10-15 min 内完成；

2. 方便：试剂易于配制，样品检测步骤简单。

使用方法：
1. 细胞裂解
（1）将培养基移除，加 PBS 轻轻洗涤（贴壁细胞可直接进行此操作，悬浮细胞要离心收集细胞）。按如下方案加入 1×Lysis Buffer(用无菌水按 4:1 稀释 A 组分)，然后将培养板放在微型震荡器上室温震荡 15 min，充分裂解细胞。

注：裂解产物可室温保存 6 h，-70℃可长期存放（裂解产物不能多次反复冻融）。
（2）将充分裂解后的裂解产物，10000-15000 rpm 离心 3-5 min，离心后将上清液移入新的 EP 管中进行后续检测。
2. 工作液配制
（1）将所有组分恢复至室温。
（2）用组分 B 将组分 C 稀释成海肾萤光素酶工作液，稀释方法为将 1 µL C 组分加入到 49 µL B 组分中。
3. 化学发光值检测
（1）按照仪器操作说明书开启具有检测化学发光功能的仪器，如多功能酶标仪，设定参数，测定时间为 10 s，测定间隔为2 s。
（2）将细胞裂解产物按照 20~100 µL 的体积加入测量管中（保持每次样品量一致）。1×Lysis Buffer 为空白对照。
（3）加入 100 µL 海肾萤光素酶工作液，测定 RLU（Relative light unit）值（建议酶标仪设置 Shaking 混匀功能）。
注：海肾萤光素酶工作液不能长时间保存，现用现配，一次性使用完毕。 

注意事项：

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验；

2. 由于温度对酶反应有影响，所以测定时，样品和试剂均需达到室温后再进行测定；

3. 海肾萤光素酶催化的生物发光的最强波长为 480 nm，为防止孔间干扰，建议使用白色不透光孔板；

4 ..B组分建议根据实验需求进行小批量分装；

5.建议现配现用，避免反复冻融；

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

应用范围：

基因表达调控研究、启动子研究