人基因组DNA，BioReagent, PCR试剂, For

PCR 不必“摸条件”

5 min 结果：可见Bioteke 2×power Taq PCR MasterMix试剂对于原核或真核生物DNA均可高效。相较于同类的taq mix的扩增效率更高，且对于高GC含量也可得到很好的扩增。取扩增产物10 μL用1%琼脂糖凝胶电泳如图可见明亮条带。 三、 cDNA扩增 人类胎盘提取的总RNA反转录的cDNA扩增1.2 kbp片段 模板：人类胎盘提取的总RNA反转录的cDNA 200 ng/50 μL Primer： PrimerF

PCR专题

写得真不错）引物设计方面还有很多话题可说，比如如何利用引物搭桥将两个片段通过PCR 而不是酶连接起来、如果要设计引物表达蛋白时注意“N 端规则”??这些有趣的话题可以见论坛内相关讨论，这将是我们推出“原核表达”专辑时的内容。PCR 成分 引用《分子克隆3》提供的PCR 标准反应条件： 模板 1pg-1μg 引物 1μmol/L DNA 聚合酶 1－5 单位 Mg2＋ 1.5mmol/L dNTPs 200μmol/L KCl 50 mmol/L 一、模板 模板可是PCR 的关键，模板

PCR 的这些小知识，您都知道吗？

的成功取决于很多因素，其反应组分在扩增中起着至关重要的作用。以下总结了在 PCR 反应体系设置中需要考虑的一些重要因素。 【模板 DNA】 DNA 扩增的模板可以是多种来源，如基因组 DNA（gDNA）、互补 DNA（cDNA）和质粒 DNA。DNA 的组成和复杂程度决定了 PCR 扩增的最佳模板起始量。比如，在 50 μL 体系中 0.1-1 ng 质粒 DNA 已经完全足够，但同样体系需要 5-50 ng 的 gDNA。最佳模板起始量同时也取决于所用的 DNA 聚合酶类型，经过基因工程改造