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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
避光;-20°C储存
- 英文名:
1-Cyclohexyl-3′-dodecylurea
- 库存:
现货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- CAS号:
402939-18-8
- 规格:
C342350-5mg/C342350-25mg/C342350-100mg
| 规格: | C342350-5mg | 产品价格: | ¥649.9 |
|---|---|---|---|
| 规格: | C342350-25mg | 产品价格: | ¥1243.9 |
| 规格: | C342350-100mg | 产品价格: | ¥5503.9 |
英文名:1-Cyclohexyl-3′-dodecylurea
纯度或规格:≥95%
SPU:C342350
CAS:402939-18-8
存储温度:避光;-20°C储存
运输条件:超低温运输
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文献和实验比较广泛,而纯化的效果也不错,通常是一步就能达到纯度为95%以上的包涵体。 8M高浓度尿素溶解后离心获得的包涵体溶解液,放在4度冰箱过夜后出现沉淀,这种现象我也在实验中遇到过;开始感觉很奇怪,后来发现是我们的冰箱的温控出了问题实验际温度要比设定温度低至少4度(呵呵,不好意思!)。不过我接着往下进行SDS-PAGE、层析等发现没有什么不良影响。所以,你不用担心也许你的蛋白也只是和你开了个玩笑呢! 三、关于包涵体的溶解: 1、 请教GST包涵体溶解 直接用8M的脲或 6M胍融解,取上清
三、关于包涵体的溶解: 1、 请教GST包涵体溶解 直接用8M的脲或 6M胍融解,取上清,测浓度。直接稀释后包被检测相应抗体。(由于快速稀释相当于复性过程,产物用于检测没有问题的) 我所用的包涵体提取方法: 1.PBS或生理盐水洗涤诱导后菌体,Buffer A重悬菌体,超声波破碎至清亮 2.4度,10000rpm离心10分钟,弃上清 3.用PBS或生理盐水洗涤沉淀2-3次 4.往沉淀中加19.7ml Buffer A及0.3ml 20%的SKL(十二烷基肌氨酸钠)贮存
冰冻,室温融解,反复几次,由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎。 5.化学处理法:有些动物细胞,例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠(SDS)、去氧胆酸钠等细胞膜破坏,细菌细胞壁较厚,可采用溶菌酶处理效果更好,我用的浓度一般为1mg/ml。 无论用哪一种方法破碎组织细胞,都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中,使大分子生物降解,导致天然物质量的减少,加入二异丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或减慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入
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