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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃储存
- 英文名:
Epimedin A
- 库存:
期货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- CAS号:
110623-72-8
- 规格:
E580384-1ml
英文名:Epimedin A
纯度或规格:10mM in DMSO
SPU:E580384
CAS:110623-72-8
存储温度:-80℃储存
运输条件:特低温运输
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文献和实验一、细胞裂解的准备 (1)1×107 细胞重悬, 其来源可为新鲜样品或贮存于- 80℃ 1mo l 冰冻清洗缓冲液中 的无DM SO 的样品, 冰冻缓冲液包括10mM HEPES (pH7. 5), 1. 5mM M gCl2, 10mM KCl, 1mM 二硫苏糖醇(DTT ) , 然后离心(16 000rpm、4℃、1m in)。 (2)重悬细胞团于100ul 冰冻裂解缓冲液, 其包含10mM T ris-HCl (pH7. 5) , 1mM MgCl2, 1mM EGTA
2.7.1PCR 鉴定体系 10X Taq buffer 3 ul 4X dNTP (10mM) 0.5 ul Taq DNA polymerase(5U/ul) 0.2ul(1U) 10uM引物 (双向) 各1ul 50%DMSO(which is optional) 1ul 模板:过夜菌液 / 挑单克隆 2ul 加灭菌水至 30ul 2.7.2 PCR 鉴定程序: 94℃ 5min 94℃ 30s 30cycle 55℃ 30s 72℃ 3min 72℃
接种, 因为细胞密度在10000/ml左右时,所测得的OD值的区间即细胞抑制率(或者增值率)的所呈现的线性关系最好,结果最可信。如果铺的太稀细胞的杀伤不会很明显,太密细胞可能都会凋亡,因为细胞长的太快营养会不够,最后导致死亡。且而细胞过密或者过少,增殖都会过快或者过慢,其增值率线性关系不佳。故而MTT细胞密度多采用10000/ml,100ul/孔。细胞密度要根据不同细胞的特点来定.如果你做的药品对细胞具有刺激作用那么取小点的细胞浓度,如果你做的药品对细胞具有抑制作用那么取大点的细胞浓度,这样与对照
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