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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
1,2,3,4,5,6,7,8-Octahydro-naphthalene
- 库存:
现货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- CAS号:
493-03-8
- 规格:
O131509-5g/O131509-25g
| 规格: | O131509-5g | 产品价格: | ¥755.9 |
|---|---|---|---|
| 规格: | O131509-25g | 产品价格: | ¥1957.9 |
英文名:1,2,3,4,5,6,7,8-Octahydro-naphthalene
纯度或规格:≥70%(GC)
SPU:O131509
CAS:493-03-8
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运输条件:常规运输
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文献和实验。 3’ RACE较简单,首先将mRNA或总RNA用Poly T引物反转录,根据一般基因具有polyA尾巴的特点,选用特异引物(根据已知序列设计)和Poly T引物PCR即可。 5’ RACE相对较难,目前流行几种5’ RACE。其一为加接头(传统),根据接头引物和自己设计特异引物PCR,可以设计巢式PCR二次扩增。另外,有利用反向PCR技术,连接成环再PCR。 特异性引物应该满足: 长度为23~28 nt;50~70%的GC含量;Tm值≥65 ℃;避免使用与AP1互补的引物,尤其
) = 0.29 pmol1 μg FX174 DNA (5,386bp) = 0.28 pmol1 μg M13mp18/19 DNA (7.250bp) = 0.21 pmol1 μg l phage DNA (48,502bp) = 0.03 pmol 1 pmol 1,000bp DNA = 0.66 μg1 pmol pUC18/19 DNA (2,688bp) = 1.77 μg1 pmol pBR322 DNA (4,361bp) = 2.88 μg1 pmol SV40 DNA (5,243
。因为这些原因,应该使用尽可能高的退火温度。对于有牢固二级结构的模板建议使用95℃变性、70℃退火/延伸的循环模式。一般来说,较长的引物及GC含量高的引物能得到较强的信号。实验结果表明,>24mer的GC含量约为50%的引物可得到最佳结果。 由于本系统采用热循环装置, 与常规的测序方法相比具有如下几点好处:(1).本方法线性扩增模板DNA 产生足够的产物使银染技术能够检测序列条带,测序反应需要0.03--2pmol模板DNA , 随模板种类而定。(2). 在每一个变性循环中的高温可以取代对双链
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