5-羟基间苯二甲酸二乙酯，39630-68-7，≥95%，阿

地高辛标记核酸探针的标记方法

标记前,应使用苯酚、氯仿抽提DNA 模板。此外,对于随机引物标记DNA 的方法而言,在标记反应之前,先将模板线性化并加热变性是至关重要的;而对寡核苷酸来说,在其3' 末端加上DIG-11-dUTP 的尾巴前,应该先经过凝胶或HPLC 纯化。 3 　杂交技术 使用地高辛标记的核酸探针进行分子杂交,其杂交动力学、杂交条件与放射性同位素标记的探针相似。探针的性质不同,杂交温度和时间也不同:DNAP不含甲酰胺:杂交温度为68 ℃,时间≥6h ;DNAP含50 %甲酰胺:杂交温度为42 ℃

分子生物学常用实验技术（page 3)

1：适用于引物 95℃ 2 分钟。然后： 95℃ 30 秒(变性), 42℃ 30 秒(退火), 70℃ 1 分钟(延伸)。 模式2:适用于≥24 碱基或略短的GC 含量≥50%的引物。 95℃ 2 分钟, 然后: 95℃ 30 秒(变性), 70℃ 30 秒(退火/延伸)。4. 在加入终止溶液之后样品可在4℃保存过夜。 （二）、测序凝胶板的制备 1、玻璃板的处理： 　　　银染测序的玻璃板一定要非常清洁，一般先用温水和去污剂洗涤，再用去离子水冲洗玻璃板，除去残留的去污

不同的胞外蛋白酶活性造成肿瘤特异的血清多肽组表达模式

。除2021.05（为大量的无组间差异的肽离子的代表）外，选定可代表组间差异的肽离子的标准化强度。24处重叠区各代表一个癌症组与对照组的谱图的二元比较结果（膀胱癌：n = 20， 绿色；前列腺癌：n = 32; 蓝色；乳腺癌：n = 21; 红色；对照组：n = 33; 黄色)。其排列方式允许经标准化后换算成同样大小的3个二元比较结果可在同样的质量范围窗内显示，各肽离子峰显示的均为单同位素峰。 特征选择发现68个肽离子特征可区别3个癌症组人群与正常组