3-羟基戊二酸二乙酯，32328-03-3，≥95%(GC)

分子生物学常用实验技术（page 3)

1：适用于引物 95℃ 2 分钟。然后： 95℃ 30 秒(变性), 42℃ 30 秒(退火), 70℃ 1 分钟(延伸)。 模式2:适用于≥24 碱基或略短的GC 含量≥50%的引物。 95℃ 2 分钟, 然后: 95℃ 30 秒(变性), 70℃ 30 秒(退火/延伸)。4. 在加入终止溶液之后样品可在4℃保存过夜。 （二）、测序凝胶板的制备 1、玻璃板的处理： 　　　银染测序的玻璃板一定要非常清洁，一般先用温水和去污剂洗涤，再用去离子水冲洗玻璃板，除去残留的去污

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作用力的差异。 5．分离参数 Ø分离度(resolution，R)――相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率，表示相邻两峰的分离程度。R＝。当W1＝W2时，R＝。当R＝1时，称为4σ分离，两峰基本分离，裸露峰面积为95.4%，内侧峰基重叠约2%。R＝1.5时，称为6σ分离，裸露峰面积为99.7%。R≥1.5称为完全分离。《中国药典》规定R应大于1.5。 Ø基本分离方程――分离度与三个色谱基本参数有如下关系： R＝×× 其中称为柱效项，为柱选择

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。R＝。当W1＝W2时，R＝。当R＝1时，称为4σ分离，两峰基本分离，裸露峰面积为95.4%，内侧峰基重叠约2%。R＝1.5时，称为6σ分离，裸露峰面积为99.7%。R≥1.5称为完全分离。 《中国药典》规定R应大于1.5。 基本分离方程——分离度与三个色谱基本参数有如下关系: R＝×× 其中称为柱效项，为柱选择性项，为柱容量项。柱效项与色谱过程动力学特性有关，后两项与色谱过程热力学因素有关。 从基本分离方程可看出，提高分离度有三种途径：①增加塔板数。方法之一是增加柱长，但这样会延长保留